2003 年度実績報告書

GFPトランスジーンをマーカーとした糸球体傷害に関わる新たな遺伝子の同定と解析

研究課題

研究課題/領域番号	15659204
研究機関	愛媛大学
研究代表者	岩崎美津子愛媛大学, 医学部, 助手 (00335902)
研究分担者	小野栄夫東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (20302218) 能勢眞人愛媛大学, 医学部, 教授 (70030913)
キーワード	GFP / 糸球体上皮細胞 / 先天性ネフローゼ症候群
研究概要	GFP (green fluorescent protein)トランスジェニック・マウスをMRL/MpTn-gld/gld (MRL/gld)マウス、およびMRL/Mp-+/+ (MRL/+)マウスと戻し交配し、GFPコンジェニツク・マウスを作成する過程において、両者においてGFP遺伝子がホモ(gfp/gfp)となったときに、生後すぐに尿蛋白、低アルブミン血症、腎機能低下がみられ、早期に死亡することを見い出した。これらのマウスの病理学的解析の結果、上皮細胞の傷害が先行することが明らかとなり、先天性ネフローゼ症候群のモデルとなりうると考えられた。GFP自体には生体への毒性はないと報告されていることから、これらの現象はGFPトランスジーンが、糸球体上皮細胞の機能に関する何らかの遺伝子部位に挿入されることにより、その遺伝子をノックアウトしたものと推測されるため、この遺伝子を確定することで、新たな糸球体上皮細胞に関わる蛋白が同定される可能性が考えられる。今年度は、主にこの糸球体上皮細胞機能に関わる遺伝子の同定を行い、以下の成果を得た。糸球体上皮細胞障害に関わる新たな遺伝子の同定: 1.MRL/gld-gfp/gfpマウスと野生由来マウスMSM/Msfとの交配マウスを作成し、マイクロサテライトマーカーを用いてGFP遺伝子の挿入部位の同定を試みたところ、第15染色体上、1.8cMまで狭めることが出来た。 2.MRL/gld-gfp/gfpマウスゲノムDNAライブラリーを作成し、GFP遺伝子をプローブとしたハイブリダイゼーションによりスクリーニングし、これをテンプレートとしてシークェンスを行った結果、トランスジーン挿入部位を決定することが出来た。その部位は1)と一致した。しかし、この部位には、機能をもつ遺伝子が存在しなかった。現在、この挿入部位前後の遺伝子に関して、発現を検討中である。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Yamada A, Ito MR, Nose M et al.: "Genetic basis of tissue-specificity of vasculitis in MRL/lpr mice."Arthritis Rheum. 48・5. 1445-1451 (2003)
[文献書誌] Fujii H, Ito MR, Nose M et al.: "Internalization of antibodies by endothelial cells via fibronectin implicating a novel mechanism in Lupus nephritis."Kidney Int. 64・5. 1662-1670 (2003)
[文献書誌] Ito MR, Nose M. et al.: "Bone marrow transfer of autoimmune diseases in an MRL strain of mice with a deficit in functional Fas ligand : Dissociation of arteritis from glomerulonephriti"Pathol Int. 53・8. 518-524 (2003)
[文献書誌] Hasegawa H, Ito MR, Nose M et al.: "Antagonist of Monocyte Chemoattractant Protein 1 ameliorates the initiation and progression of lupus nephritis and renal vasculitis in MRL/lpr mice."Arthritis Rheum. 48・9. 2555-2566 (2003)
[文献書誌] Sasaki M, Ito MR, et al.: "Antagonist of secondary lymphoid-tissue chemokine (CDR ligand 21) prevents the development of chronic graft-versus-host disease in mice."J Immunol. 170・1. 588-596 (2003)
[文献書誌] Magoori K.Ito MR, Nose M et al.: "Severe Hypercholesterolemia, impaired fat tolerance and advanced atherosclerosis in mice lacking both LDL receptor-related protein 5 (LRP5) and apolipo"J Biol Chem. 278. 11331-11336 (2003)
[文献書誌] Nakatani K, Ito MR, Nose M et al.: "Endothelial adhesion molecules in glomerular lesions : Association with their severity and diversity in lupus models."Kidney Int. (accepted).
[文献書誌] 伊藤美津子, 能勢眞人(分担執筆): "別冊医学あゆみ腎疾患-state of arts 2003-2005"医歯薬出版(株)(東京). 442 (2003)

2003 年度 実績報告書

GFPトランスジーンをマーカーとした糸球体傷害に関わる新たな遺伝子の同定と解析

研究代表者

岩崎 美津子 愛媛大学, 医学部, 助手 (00335902)

研究成果

[文献書誌] Yamada A, Ito MR, Nose M et al.: "Genetic basis of tissue-specificity of vasculitis in MRL/lpr mice."Arthritis Rheum. 48・5. 1445-1451 (2003)

[文献書誌] Fujii H, Ito MR, Nose M et al.: "Internalization of antibodies by endothelial cells via fibronectin implicating a novel mechanism in Lupus nephritis."Kidney Int. 64・5. 1662-1670 (2003)

[文献書誌] Ito MR, Nose M. et al.: "Bone marrow transfer of autoimmune diseases in an MRL strain of mice with a deficit in functional Fas ligand : Dissociation of arteritis from glomerulonephriti"Pathol Int. 53・8. 518-524 (2003)

[文献書誌] Hasegawa H, Ito MR, Nose M et al.: "Antagonist of Monocyte Chemoattractant Protein 1 ameliorates the initiation and progression of lupus nephritis and renal vasculitis in MRL/lpr mice."Arthritis Rheum. 48・9. 2555-2566 (2003)

[文献書誌] Sasaki M, Ito MR, et al.: "Antagonist of secondary lymphoid-tissue chemokine (CDR ligand 21) prevents the development of chronic graft-versus-host disease in mice."J Immunol. 170・1. 588-596 (2003)

[文献書誌] Magoori K.Ito MR, Nose M et al.: "Severe Hypercholesterolemia, impaired fat tolerance and advanced atherosclerosis in mice lacking both LDL receptor-related protein 5 (LRP5) and apolipo"J Biol Chem. 278. 11331-11336 (2003)

[文献書誌] Nakatani K, Ito MR, Nose M et al.: "Endothelial adhesion molecules in glomerular lesions : Association with their severity and diversity in lupus models."Kidney Int. (accepted).

[文献書誌] 伊藤美津子, 能勢眞人(分担執筆): "別冊医学あゆみ 腎疾患-state of arts 2003-2005"医歯薬出版(株)(東京). 442 (2003)

2003 年度実績報告書

岩崎美津子愛媛大学, 医学部, 助手 (00335902)

[文献書誌] 伊藤美津子, 能勢眞人(分担執筆): "別冊医学あゆみ腎疾患-state of arts 2003-2005"医歯薬出版(株)(東京). 442 (2003)