爆発的に増殖する肝上皮性幹様細胞の大量培養法の確立とそれを応用した人工肝臓の作成

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15659305
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 小暮 公孝 群馬大学, 医学部, 講師 (80143220)
• 研究分担者: 小島 至 群馬大学, 生体調節研究所, 教授 (60143492)
• キーワード: 肝上皮性幹様細胞 / 肝再生 / 人工肝臓 / 大量培養 / 肝オルガノイド

研究概要

本研究では爆発的に増殖する肝上皮性幹様細胞の大量培養法の確立とそれを応用した人工肝臓の作成法を確立することを目的としている。本年度の研究実施計画としては1.爆発的に増殖する肝上皮性幹様細胞の採取法の改良、2.肝上皮性幹様細胞の大量培養法の確立の二つを目標にした。第一の目標に関しては、肝臓を構成する細胞を細胞腫ごとに分離するこれまでの遠心加速度の条件にさらに改良を加えて、より有効に肝上皮性幹様細胞が単離される条件を求めて実験を行った。その結果、この細胞は類洞内皮細胞と類似の遠心加速度の影響を受けることが分かった。従って、次に、この類洞内皮細胞と上皮性幹様細胞を分離する方法を検討した。その結果、90%以上の確率で両細胞を分離できる条件を見つけることができた。第2の目標である肝上皮性幹様細胞の大量培養法の確立に関しては、この細胞はディッシュの中では爆発的に増殖することがすでに明らかであるが、3次元の培養で効率的に増殖を可能にする増殖条件は未だ確立されていない。現在、タイテック社製のCO2インクベーターつき振盪フラスコ培養器を用いて培養条件を検討中である。大量培養法が確立したならばこれらの幹様細胞を効率よく分化させ、この細胞に分化の場を与えてやり高次機能を持つ細胞へ分化させる試みを行い、同時に95%肝切除を行ったラットの体内に移植し、代用肝臓として機能するか検討する予定である。

研究成果

• [文献書誌] Kimitaka Kogure: "A device of the separation of the rat liver sinusoidal endotheleal cells and the culture in the three-dimensional matrix"Abstract of 11th Congress of the European Society for Organ Transplantation. Abstracts. 79-79 (2003)
• [文献書誌] Kimitaka Kogure: "Long-term survival after hepatectomy for large metastatic breast cancer: a case report."Hepato-Gastroenteroloy. 50. 827-829 (2003)
• [文献書誌] Kimitaka Kogure: "Re-proposal for Hjortsjo's segmental anatomy on the anterior segment in human liver"Archives of Surgery. 137. 1118-1124 (2002)
• [文献書誌] Ichikawa T: "Transforming growth factor beta and activin tonically inhibit DNA synthesis in the rat liver."Hepatology. 34(5). 918-925 (2001)
• [文献書誌] Fumio Arisawa: "Snowboarding splenic injury : four case reports."Injury. 33(2). 173-177 (2002)
• [文献書誌] 小暮公孝: "特集-人工肝臓研究-最近の進歩 III.幹細胞の培養 3.肝幹(様)細胞の培養"外科. 63(5). 571-580 (2001)
• [文献書誌] Kimitaka Kogure: "The role of activin and transforming growth factor-b in the regulation of organ mass in the rat liver."Hepatology. 31. 916-921 (2000)
• [文献書誌] Kimitaka Kogure: "Relation among portal segmentation, proper hepatic vein, and external notch of the caudate lobe in the human liver."Annals of Surgery. 231(2). 223-228 (2000)
• [文献書誌] Ishizaki M: "Hepatic arterial infusion chemotherapy for liver metastasis"The Kitakanto Medical Journal. 50(2). 111-115 (2000)
• [文献書誌] Kori T: "Sonographic features of acute colonic diverticulitis : the "Dome sign""Journal of Clinical Ultrasopund. 28(7). 340-346 (2000)
• [文献書誌] Kimitaka Kogure: "Evaluation of serum uric acid changes in different forms of hepatic vascular inflow occlusion in human liver surgeries"Life Science. 64(5). 305-313 (1999)
• [文献書誌] Kimitaka Kogure: "A comparative study of the anatomy of rat and human livers"Journal of Hepatobiliary Pancreatic Surgeries. 6. 171-175 (1999)