| 研究課題/領域番号 |
15659493
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
森山 啓司 徳島大学, 歯学部, 教授 (20262206)
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| 研究分担者 |
大庭 知子 徳島大学, 歯学部, 助手 (10274242)
大庭 康雄 徳島大学, 医学部・歯学部附属病院, 講師 (40294706)
板倉 光夫 徳島大学, ゲノム機能研究センター, 教授 (60134227)
三木 善樹 徳島大学, 歯学部, 助手 (50294707)
堀内 信也 徳島大学, 歯学部, 助手 (70263861)
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| キーワード | p63 / EEC症候群 / トランスジェニックマウス / 点突然変異 |
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| 研究概要 |
欠指・外胚葉異形成・口唇口蓋裂(EEC)症候群発症の分子メカニズムを明らかにするため、そのモデルマウス作製を前提としてp63遺伝子点突然変異を含むトランスジーンを用い、トランスジェニックマウスの作製を試みた。我々がこれまでに遺伝子解析した日本人EEC症候群患者と同一の突然変異を含むp63遺伝子を、遺伝子組換え法によりCAGプロモーターの下流に組込むことでトランスジーンとした。そのトランスジーンをマウス受精卵の雄性前核に微量注入することでトランスジェニックマウスの作製を行った。p63遺伝子には複数のアイソフォームが報告されているが、上皮に発現すると考えられているΔNp63αアイソフォームを用いたトランスジェニックマウス胚の1匹において口蓋裂の形成が認められた。マウスゲノムDNA中におけるトランスジーン組込みの確認を、尾から抽出したゲノムDNAをテンプレートとしたPCRにより行った。さらにこのマウスにおけるp63の発現を野生型同腹仔と抗体染色により比較したところ、口蓋裂形成マウスでは全身性にその発現が強く確認された。現在、このトランスジェニックマウスの再現性について検討を行っている。
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