MMP-7(マトリライシン)の活性化と癌細胞浸潤・転移

2004 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15790193
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 潮見 隆之 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (80348797)
• キーワード: MMP-7 / MT1-MMP / ADAM12 / HB-EGF / 発現クローニング

研究概要

1)潜在型MMP-7活性化分子のスクリーニング:
ヒト肺癌組織のcDNAライブラリーをCOS7細胞に導入し、潜在型MMP-7を活性化する遺伝子導入細胞をスクリーニングした(発現クローニング法)。全体の70%のスクリーニングを終え、数種類の候補遺伝子を同定した。使用する基質の改良と条件設定の最適化により、疑陽性率を低下させることに成功した。
2)活性化分子の機能解析
上記の候補遺伝子産物の中から、精製品として入手が比較的容易なMMP-7活性化因子を用いて、潜在型MMP-7活性化作用を生化学的に検討した。Zymographyを用いた解析では、そのうち1種類の分子でMMP-7の活性化を確認した。本活性化分子については、現在kineticsの解析を含め、詳細な活性化機構を検討中である。また、この活性化に関わるドメインを決定するためにミュータントタンパクの作成を行った。
3)MMP-7近縁分子の活性化と癌細胞に与える影響の検討
MMP-7近縁分子であるMT1-MMPによる癌浸潤における機能制御の解析から、新規にMT1-MMPの細胞内ドメインに結合し、浸潤能を制御する分子を明らかにした。また別の近縁分子であるADAM12が、glioblastomaをはじめとする悪性腫瘍に発現しており、増殖因子であるHB-EGFのシェディングを通して、癌の浸潤だけではなく、増殖に関わっていることを見いだした。MMP-7はADAM分子群の活性化に関わっており、単に細胞外基質分解に留まらない多彩な機能を有する可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] ADAM12 is selectively overexpressed in human glioblastomas and is associated with glioblastoma cell proliferation and shedding of heparin-binding epidermal growth factor. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kodama T, Ikeda E, Okada A, Ohtsuka T, Shimoda M, Shiomi T, Yoshida K, Nakada M, Obuchi E, Okada Y.
  • 雑誌名: Am J Pathol. 165・5 ページ: 1743-1753
• [雑誌論文] Membrane-type 1 matrix metalloproteinase cytoplasmic tail-binding protein-1 is a new member of the cupinsuperfamily. A possible multifunctional protein acting as an invasion suppressor down-regulated in tumors. (2004)
  • 著者名/発表者名: Uekita T, Gotoh I, Kinoshita T, Itoh Y, Sato H, Shiomi T, Okada Y, Seiki M.
  • 雑誌名: J Biol Chem. 279・13 ページ: 12734-12743