転写因子CREBを標的とした関節リウマチ制御の基礎的検討

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15790196
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 石津 明洋 北海道大学, 大学院・医学研究科, 講師 (60321957)
• キーワード: 関節リウマチ / CREB / ATF-1 / dominant negative / IL-6 / 滑膜細胞 / シンビスウイルスベクター / 遺伝子治療

研究概要

ヒトT細胞白血病ウイルスI型(HTLV-I)のLTR-env-pX遺伝子を導入したトランスジェニックラット(env-pXラット)はヒト関節リウマチ(RA)類似の関節炎を発症する。RAの病態には、滑膜の増殖や滑膜細胞が産生するIL-6、IL-8など炎症性サイトカインが重要な役割を果たしていると考えられている。env-pXラットの関節炎はその分子病態を良く反映したモデルである。本研究では、滑膜細胞の増殖や炎症性サイトカイン産生を転写レベルで制御するCREBに注目したCREBはロイシンジッパー構造をもつ転写因子で、同じ分子ファミリーに属するATF-1と二量体を形成して標的となるDNA塩基配列に結合し、遺伝子転写活性を発揮する。そこで、CREBを競合的に阻害するDominant Negative ATF-1(ATF-1DN)を作製し、env-pXラット由来の培養関節滑膜細胞に遺伝子導入して、CREBにより転写調節される細胞周期関連分子や炎症性サイトカインの発現変化を検討した。細胞周期関連分子ではcyclin Dには明らかな変化はなかったが、ATF-1DNの導入によりCDK4の発現が減少した。炎症性サイトカインではIL-8ファミリーのGroには変化がなかった一方、IL-6の発現が減少した。
また、生体内におけるATF-1DNの関節炎に対する治療効果を検証する目的で、シンビスウイルスベクターにATF-1DN遺伝子を組み込み、腫脹したenv-pXラット足関節に注射した。対照にはlacZ遺伝子を組み込んだベクターを用いたATF-1DNの遺伝子導入により、env-pXラット関節炎の抑制傾向が肉眼的ならびに組織学的に確認された。ATF-1DNの遺伝子導入により、滑膜細胞の増殖やIL-6産生が抑制され、RAの治療につながる可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Ishizu A, et al.: "Transduction of dominant negative ATF-1 suppresses the pX gene expression in joint fibroblastic cells derived from HTLV-I transgenic rats."Exp.Mol.Pathol.. 74・3. 309-313 (2003)
• [文献書誌] Higuchi M, et al.: "Functional alteration of peripheral CD25^+CD4^+ immunoregulatory T cells in a transgenic rat model of autoimmune diseases."J.Autoimmun.. 20・1. 43-49 (2003)
• [文献書誌] Kawada M, et al.: "Vaccination of fusion cells of rat dendritic and carcinoma cells prevents tumor growth in vivo."Int.J.Cancer. 105・4. 520-526 (2003)
• [文献書誌] Nakaya H, et al.: "In vitro model of suicide gene therapy for alpha-fetoprotein-producing gastric cancer."Anticancer Res.. 23・5A. 3795-3800 (2003)
• [文献書誌] Tsuchikawa T, et al.: "Hematopoietic progenitor cells as possible origins of epithelial thymoma in a human T lymphocyte virus type I pX gene transgenic rat model."Lab.Invest.. 84・2. 245-252 (2004)
• [文献書誌] 石津明洋: "自己免疫疾患における分子標的遺伝子治療の展望-CREB分子-"臨床免疫. 40・6. 654-658 (2003)
• [文献書誌] 石津明洋: "モデル動物の作製と維持"エル・アイ・シー(未定). (2004)