| 研究概要 |
1.MMP-2欠損マウス、野生型マウスの肺胞上皮分離培養をCortiらの方法(Am.J.Respir.Cell Mol.Biol,1996)に準じて行った。肺から分離した細胞にビオチン化した抗CD32,CD45抗体を作用させ、ストレプトアビジン付着のマグネット粒子を加え、マグネット管に作用させ、マクロファージを吸着し、肺胞上皮の純度を上げる方法である。一匹からの回収率は非常に悪く、4匹にて回収することにした。肺胞上皮は、分離後一日で50%は、死にいたり、三日目には形質転換を起こすことがわかり、II型肺胞上皮のままで、遊走実験を行うのは、困難であることがわかった。細胞死の原因を検索中である。
2.肺胞上皮同定のため、組織化学的な方法として、ラメラ体を染色するタンニン酸染色を、免疫組織学的方法として、抗SP-C抗体を用いて同定を行っている。
3.肺胞上皮の遊走実験は、上記理由から困難なため、lung fibroblastを用いて、MMP-2、EGFの関係を中心に実験を進行中である。
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