2003 年度実績報告書

臍帯血CD25陽性CD4陽性T細胞およびNK細胞におけるDNAマイクロアレイ解析

研究課題

研究課題/領域番号	15790554
研究機関	九州大学
研究代表者	野村明彦九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (00325531)
キーワード	臍帯血 / 制御性T細胞 / CD25陽性CD4陽性T細胞 / ナイーブT細胞 / Foxp3 / DNAマイクロアレイ
研究概要	臍帯血T細胞に関する研究:臍帯血CD25^+CD4^+細胞の抑制能に関わる分子の同定臍帯血中に抑制能を有するCD25^+CD4^+細胞が存在し、これらはナイーブT細胞の特徴を示すことを明らかにしてきた。抑制能に関わる分子として、昨年、マウスの抑制性CD25^+CD4^+細胞においてFoxp3とGITRの2つ分子が報告された。臍帯血を含めたヒトにおけるFoxp3とGITRの抑制性CD25^+CD4^+細胞における意義は不明であることから、臍帯血および成人末梢血CD25^+CD4^+細胞における同分子の発現を検討した。方法として臍帯血および成人末梢血CD25^+CD4^+細胞を純化しcDNAを精製後、Foxp3の定量PCRおよびGITRの半定量PCRを行った。Foxp3の発現は臍帯血および成人末梢血ともにCD25^-CD4^+細胞に比し、CD25^+CD4^+細胞で有意に高発現していた。また、臍帯血および成人末梢血のCD25^+CD4^+細胞の間では発現に有意差を認めなかった。一方、GITRの発現は臍帯血では認められず、成人末梢血ではCD25^-CD4^+細胞でむしろ高い傾向にあった。以上の結果より臍帯血を含むヒトCD25^+CD4^+細胞においてもマウス同様にFoxp3が抑制能を規定する因子であることが示唆された。 30K Oligo chipによるDNAマイクロアレイ解析について微少細胞数からの解析を検討した。正常成人および免疫不全の末梢血単球細胞よりmRNAの抽出・リニア増幅を行い、DNAマイクロアレイを行った。細胞数5x10^5よりアレイを行うに十分なリニア増幅が可能であった。また、Hybridizeしたオリゴチップよりスキャン、数値化、統計解析(GeneSpringによる)を行い、2群間で特に有意に異なる発現を示した39遺伝子のうち3遺伝子を抽出・選択し、定量PCRにより2遺伝子については再現性を確認し得た。

研究成果

(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Ohga S, et al.: "Cytokine imbalance in hyper-IgE syndrome : reduced expression of transforming growth factor beta and interferon gamma genes in circulating activated T cells."Br J Haematol. 121・2. 324-331 (2003)
[文献書誌] Takahata Y, et al.: "Detection of interferon-gamma-inducible chemokines in human milk."Acta Paediatr. 92・6. 659-665 (2003)
[文献書誌] Takada H, et al.: "Increased serum levels of interferon-gamma-inducible protein 10 and monokine induced by gamma interferon in patients with haemophagocytic lymphohistiocytosis."Clin Exp Immunol. 133・3. 448-453 (2003)
[文献書誌] Ohga S, et al.: "Dominant beta-thalassemia with hemoglobin Hradec Kralove : enhanced hemolysis in the spleen."Int J Hemato. 178・4. 329-334 (2003)
[文献書誌] Kusuhara K, et al.: "Tumour necrosis factor receptor-associated periodic syndrome with a novel mutation in the TNFRSF1A gene in a Japanese family."Eur J Pediatr. 163・1. 30-32 (2004)
[文献書誌] Takada H, et al.: "Female agammaglobulinemia due to the Bruton tyrosine kinas deficiency caused by extremely skewed X-chromosome inactivation."Blood. 103・1. 185-187 (2004)
[文献書誌] 野村明彦, その他: "αβ型T細胞レセプター欠損による複合免疫不全症"臨床免疫. 40巻 1. (2003)

2003 年度 実績報告書

臍帯血CD25陽性CD4陽性T細胞およびNK細胞におけるDNAマイクロアレイ解析

研究代表者

野村 明彦 九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (00325531)

研究成果

[文献書誌] Ohga S, et al.: "Cytokine imbalance in hyper-IgE syndrome : reduced expression of transforming growth factor beta and interferon gamma genes in circulating activated T cells."Br J Haematol. 121・2. 324-331 (2003)

[文献書誌] Takahata Y, et al.: "Detection of interferon-gamma-inducible chemokines in human milk."Acta Paediatr. 92・6. 659-665 (2003)

[文献書誌] Takada H, et al.: "Increased serum levels of interferon-gamma-inducible protein 10 and monokine induced by gamma interferon in patients with haemophagocytic lymphohistiocytosis."Clin Exp Immunol. 133・3. 448-453 (2003)

[文献書誌] Ohga S, et al.: "Dominant beta-thalassemia with hemoglobin Hradec Kralove : enhanced hemolysis in the spleen."Int J Hemato. 178・4. 329-334 (2003)

[文献書誌] Kusuhara K, et al.: "Tumour necrosis factor receptor-associated periodic syndrome with a novel mutation in the TNFRSF1A gene in a Japanese family."Eur J Pediatr. 163・1. 30-32 (2004)

[文献書誌] Takada H, et al.: "Female agammaglobulinemia due to the Bruton tyrosine kinas deficiency caused by extremely skewed X-chromosome inactivation."Blood. 103・1. 185-187 (2004)

[文献書誌] 野村明彦, その他: "αβ型T細胞レセプター欠損による複合免疫不全症"臨床免疫. 40巻 1. (2003)

2003 年度実績報告書

野村明彦九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (00325531)