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過去習慣流産外来に来院された原因不明習慣流産患者、およびその夫に同意書を得て保存してあるリンパ球からPhenol-Chloroform法によりDNAを抽出した。58組の夫婦、および妻のみ4人であった。一方対照として健常人100人から同意の上採血しDNAを抽出した。
NK細胞受容体の一つであるKIR(Killer Cell Immunoglobulin-like Receptors)について、PCR-SSP(sequence specific primers)法でtypingを行った。この方法はもともと欧米人のDNAを用いて開発された方法であるが、日本人に対してもおおむね機能することが分かった。一部のKIR遺伝子には多型が存在することが判明したが、複数の部位でprimerを設計してあるので、typing自体は可能であった。つまり日本人向けに新しくtyping systemを構築する必要は無かった。
KIRは大きく分額してAタイプとBタイプのハプロタイプが存在する。習慣流産患者の夫ではBタイプのハプロタイプの頻度が高いことが示された。その意味するところを調べるため、KIRのligandであるHLA-Cのtypingを始めたところである。HLA-Cは当初胎盤絨毛には発現していないと思われていたが、その後弱く発現しており、しかもKIRのligandであることが示され、その妊娠免疫における役割が注目されている。現在KIRハプロタイプとHLA-Cとの対応に有意な関連があるか検討中である。
なお、今回習慣流産患者夫婦および健常者からinformed consentの上DNAを抽出し、そのゲノムを解析することは、東京大学ヒトゲノム倫理審査委員会で承認された(承認番号633)。また検体は規定に従い連結可能匿名化された。
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