| 研究課題/領域番号 |
15F15391
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
鈴木 信弘 岡山大学, 資源植物科学研究所, 教授 (70206514)
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| 研究分担者 |
ALAM MD. 岡山大学, 資源植物科学研究所, 外国人特別研究員
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| 研究期間 (年度) |
2015-11-09 – 2018-03-31
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| キーワード | ヤドヌシウイルス / ヤドカリウイルス / 菌類ウイルス / dsRNA |
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| 研究実績の概要 |
[W1032粒子の精製画分構成成分の解析～キャプシドレスYkV1の証明～]
1) W1032粒子の精製画分の調整と粒子蛋白質成分のペプチドマスフィンガープリンティングによるキャプシド蛋白質(CP)遺伝子のマッピングを行い、yado-nushi virus 1(YnV1)の５’側にあるORFがコードすることを明かにした。
2) W1032粒子画分から検出されるCPのN末端配列を決定し、上記１の結果と合致することを確認した。
3) YnV1-CP組換え蛋白質に対する抗体を用いた免疫沈降法により、YnV1-CPによるYkV1 RNAのヘテロ粒子化を証明した。
4) ウエスタン解析による両ウイルス由来RNA依存RNA合成酵素（RdRp）(微量構成成分)の粒子画分から検出する。この実験は、YnV1のCPにより、YkV1 RNAだけではなくRdRpも粒子化されるかを明らかにした。この結果は、YkV1 RNA合成に自前の酵素を使用することを示唆する。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の研究実施計画に従って、研究が進んでいる。
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| 今後の研究の推進方策 |
[yado-kari virus 1のyado-nushi virus1への複製依存性と宿主との相互作用] を解明する。
5) 粒子トランスフェクション法によるYnV1単独感染株、混合感染株を作出する。6) YkV1感染性完全長cDNAの作製し、YnV1単独感染株に導入することでYkV1の「ヤドカリ性」を証明する(RNA Virophageの証明)。7) 感染性クローンが得られた場合は、各種変異株（RdRpモティーフ、ポリプロテイン切断部位等）を作成し、それらのYkV1複製能への影響を調べる。8) 白紋羽病菌と分類上目が異なるクリ胴枯病菌(モデル糸状菌宿主)での複製能を調べる。9) 複製が確認された場合、ウイルス／ウイルス間、ウイルス／宿主間の相互作用を各種の宿主変異株を用いて解析する。特に、抗ウイルス作用をもつRNAサイレンシングの影響を変異株を用いて調べる。
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