多能性幹細胞を用いた新規副次肝作成技術開発―腸管の肝臓化―

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15H01803
• 研究機関: 信州大学
• 研究代表者: 佐々木 克典 信州大学, 学術研究院医学系, 教授 (30170666)
• 研究分担者: 松本 司 いわき明星大学, 薬学部, 教授 (00173906) ; 岳 鳳鳴 信州大学, 学術研究院医学系, 助教 (20532865) ; 田中 榮司 信州大学, 学術研究院医学系, 教授 (50163506) ; 友常 大八郎 信州大学, 学術研究院医学系, 助教 (80283802)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 再生医工学 / 網羅的遺伝子解析 / 細胞移植

研究実績の概要

最終年度はカニクイザルを用いたトランスレイショナルリサーチの完成及びアンモニア環境下における分化誘導肝細胞の質と機能性を判定することを目的に、網羅的メタボローム解析による代謝系の解析に研究を集中した。カニクイザルへの移植では、個体数をさらに増やし、空腸粘膜下組織に分化誘導肝細胞塊を移植した。タクロリムスで免疫拒絶を抑制した。１か月後、試料を摘出し、抗ヒト抗体で染色したところ、散在して存在するものも含め、細胞、組織として生存している領域を確認できた。１か月間という短い期間の経過を見ているため、胆管系の形成までは把握はできなかったが、この期間中、全例において奇形腫の形成はなかった。また１か月後に全例試料摘出でき、途中で免疫拒絶などでエンドポイントを迎えることはなかった。以上、このプロジェクトで計画した方法により霊長類への移植は可能だと判断した。メタボローム解析はヒトES細胞、正常肝細胞とアンモニア環境下で分化誘導を行った細胞塊とを比較した。以前の網羅的遺伝子解析では肝細胞に関わる遺伝子発現が著しく高まることを認めていた。一方、メタボローム解析では、ヒトES細胞と大きく隔たった細胞集団であるだけでなく、酵素活性が正常肝細胞とは比較できないほど高まっていた。言葉をかえれば、機能発現が極限まで引き出されていた。正常肝細胞をアンモニア環境下に晒していないため、肝細胞としての機能発現なのかはまだ確証できないが、極めて興味深い結果である。現在詳細な解析を行っており、最終報告までには具体的な特徴を抽出できると考えている。また、３０年度においてもヌードラットを用いた移植研究を継続し、腸管粘膜下組織における肝組織形成をみ、血管形成などの具体的な所見をさらに積み上げることができた。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] .Cell biological profiling of reprogrammed cancer stem cell-like colon cancer cells maintained in culture. (2019)
  • 著者名/発表者名: Hirashima K, Yue F, Kobayashi M, Uchida Y, Nakamura S, Tomotsune D, Matsumoto K, Takizawa-Shirasawa S, Yokoyama T, Kanno H, Sasaki K.
  • 雑誌名: Cell Tissue Res. 巻: 375 ページ: 697-707
  • DOI: 10.1007/s00441-018-2933-8.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Induced Pluripotent Stem Cells as a Model for Therapy Personalization of Pediatric Patients: Disease Modeling and Drug Adverse Effects Prevention. (2018)
  • 著者名/発表者名: Genova E, Pelin M, Sasaki K, Yue F, Lanzi G, Masneri S, Ventura A, Stocco G, Decorti G.
  • 雑誌名: Curr Med Chem. 巻: 25 ページ: 2826-2839
  • DOI: Genova E, Pelin M, Sasaki K, Yue F, Lanzi G, Masneri S, Ventura A, Stocco G, Decorti G.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] .Earlobe-like peritoneal appendage near the angle of His: a useful landmark for demarcating the lateral margin of the gastric cardia. (2018)
  • 著者名/発表者名: Hirashima K, Yue F, Tomotsune D, Sasaki K
  • 雑誌名: Anat Sci Int. 巻: 93 ページ: 82-87
  • DOI: 10.1007/s12565-016-0374-6.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Simulation of Embryonic Environments Produced by the Effect of Estradiol on Induced Pluripotent Stem Cells (2018)
  • 著者名/発表者名: Sawako Sakai1, Daihachiro Tomotsune1,2, Kanji Hirashima1, Sakiko Takizawa Sakai
  • 雑誌名: J Regen Med 巻: 7 ページ: -
  • DOI: 10.4172/2325-9620.1000144
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 頸部の解剖学的事項 (2018)
  • 著者名/発表者名: 佐々木克典
  • 雑誌名: 小児内科 巻: ５０ ページ: １６３－１６８
• [雑誌論文] Serum autotaxin is a useful liver fibrosis marker in patients with chronic hepatitis B virus infection. (2018)
  • 著者名/発表者名: Joshita S, Ichikawa Y, Umemura T, Usami Y, Sugiura A, Shibata S, Yamazaki T, Fujimori N, Komatsu M, Matsumoto A, Igarashi K, Ota M, Tanaka E
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 48 ページ: 275-285
  • DOI: 10.1111/hepr.12997.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Serum autotaxin levels are correlated with hepatic fibrosis and ballooning in patients with non-alcoholic fatty liver disease. (2018)
  • 著者名/発表者名: Fujimori N, Umemura T, Kimura T, Tanaka N, Sugiura A, Yamazaki T, Joshita S, Komatsu M, Usami Y, Sano K, Igarashi K, Matsumoto A, Tanaka E
  • 雑誌名: World J Gastroenterol 24 (11) 1239-1249, 2018 巻: 24 ページ: 1239-1249
  • DOI: 10.3748/wjg.v24.i11.1239.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Mild drinking habit is a risk factor for hepatocarcinogenesis in non-alcoholic fatty liver disease with advanced fibrosis. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kimura T, Tanaka N, Fujimori N, Sugiura A, Yamazaki T, Joshita S, Komatsu M, Umemura T, Matsumoto A, Tanaka E
  • 雑誌名: World J Gastroenterol 巻: 24 ページ: 1440-1450
  • DOI: doi: 10.3748/wjg.v24.i13.1440.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Changes in serum levels of autotaxin with direct-acting antiviral therapy in patients with chronic hepatitis C. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yamazaki T, Joshita S, Umemura T, Usami Y, Sugiura A, Fujimori N, Kimura T, Matsumoto A, Igarashi K, Ota M, Tanaka E
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 13 ページ: -
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0195632. eCollection 2018
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Serum Autotaxin Is a Useful Disease Progression Marker in Patients with Primary Biliary Cholangitis. (2018)
  • 著者名/発表者名: Joshita S, Umemura T, Usami Y, Yamashita Y, Norman GL, Sugiura A, Yamazaki T, Fujimori N, Kimura T, Matsumoto A, Igarashi K, Yoshizawa K, Ota M, Tanaka E
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 8 ページ: -
  • DOI: 10.1038/s41598-018-26531-0.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Miglitol attenuates non-alcoholic steatohepatitis in diabetic patients. (2018)
  • 著者名/発表者名: Komatsu M, Tanaka N, Kimura T, Fujimori N, Sano K, Horiuchi A, Sugiura A, Yamazaki T, Shibata S, Joshita S, Umemura T, Matsumoto A, Tanaka E
  • 雑誌名: Hepatol Res 巻: 48 ページ: 1092-1098
  • DOI: 10.1111/hepr.13223.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Quantitative analysis of serum chemokines associated with treatment failure of direct-acting antivirals in chronic hepatitis C. (2018)
  • 著者名/発表者名: Umemura T, Yamazaki T, Joshita S, Sugiura A, Fujimori N, Matsumoto A, Ota M, Tanaka E
  • 雑誌名: Cytokine 巻: 111 ページ: 357-363
  • DOI: 0.1016/j.cyto.2018.10.004.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] KIR2DL2 combined with HLA-C1 confers risk of hepatitis C virus-related hepatocellular carcinoma in younger patients. (2018)
  • 著者名/発表者名: Saito H, Umemura T, Joshita S, Yamazaki T, Fujimori N, Kimura T, Komatsu M, Matsumoto A, Tanaka E, Ota M
  • 雑誌名: Oncotarget 9 (28) 19650-19661, 2018 巻: 9 ページ: 19650-19661
  • DOI: 10.18632/oncotarget.24752. eCollection 2018 Apr 13
  • 査読あり
• [雑誌論文] Past history of hepatocellular carcinoma is an independent risk factor of treatment failure in patients with chronic hepatitis C virus infection receiving direct-acting antivirals. (2018)
  • 著者名/発表者名: Sugiura A, Joshita S, Umemura T, Yamazaki T, Fujimori N, Kimura T, Matsumoto A, Igarashi K, Usami Y, Wada S, Mori H, Shibata S, Yoshizawa K, Morita S, Furuta K, Kamijo A, Iijima A, Kako S, Maruyama A, Kobayashi M, Komatsu M, Matsumura M, Miyabayashi C, Ichijo Tet al.
  • 雑誌名: J Viral Hepat 巻: 25 ページ: 1462-1471
  • DOI: 10.1111/jvh.12973.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] PROLIFERATION CONTROL CULTURE OF HUMAN ES/IPS CELLS. (2018)
  • 著者名/発表者名: Tadayuki Yokoyama1, Sakiko Takizawa-Shirasawa1, Shunsuke Fujimoto1, Akiko Yoshitome, Kanji Hirashima, Fengming Yue, Daihachiro Tomotsune,. Katsunori Sasaki.
  • 学会等名: ISSCR2018 Annual Meeting
  • 国際学会
• [学会発表] ROLE OF POLYCOMB GROUP GENES IN STABILITY OF UNDIFFERENTIATED STATE OF HUMAN PLURIPOTENT STEM CELLS. (2018)
  • 著者名/発表者名: Daihachiro Tomotsune, Akiko Yoshitome, Kanji Hirashima, Masako Fujii, Fengming Yue, Ken Matsumoto, Sakiko Takizawa-Shirasawa, Tadayuki Yokoyama, Katsunori Sasaki.
  • 学会等名: ISSCR2018 Annual Meeting
  • 国際学会
• [学会発表] ヒトiPS細胞の増殖制御と新規培養法の検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 藤本 俊介、滝澤 佐季子、平島 寛司、岳 鳳鳴、吉留 明子、友常 大八郎、横山 忠幸、佐々木 克典
  • 学会等名: 第17回 日本再生医療学会総会
• [学会発表] 膜電位感受性色素(VSD)を用いた光計測技術によるリプログラミングがん細胞膜電位計測法 (2018)
  • 著者名/発表者名: 平島 寛司、冨永 貴志、冨永 洋子、岳 鳳鳴、滝澤 佐季子、横山 忠幸、松本 健、友常 大八郎、佐々木 克典
  • 学会等名: 第17回 日本再生医療学会総会
• [学会発表] 脾臓再生を利用した脾洞内皮細胞の機能解明 (2018)
  • 著者名/発表者名: 佐々木克典
  • 学会等名: 第３１回日本小児脾臓研究会
• [学会発表] 肉眼解剖学から組織学への連続性について (2018)
  • 著者名/発表者名: 佐々木克典
  • 学会等名: 第１２３回解剖学会総会
  • 招待講演
• [学会発表] B 型肝炎ウイルスに対する新規治療法開発の展望 TDF+Peg-IFN併用療法とTDF単独療法におけるHBsAg量低下効果の比較 (2018)
  • 著者名/発表者名: 松本晶博、城下智、田中榮司
  • 学会等名: 第104回日本消化器病学会総会
  • 招待講演
• [学会発表] Ｂ型肝炎～HBs抗原陰性化を目指した治療戦略～ TDF/Peg-IFN併用療法におけるHBsAg量低下と関連する因子の検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 城下智、松本晶博、田中榮司
  • 学会等名: 第54回日本肝臓学会総会
  • 招待講演
• [学会発表] Persistently Normal ALT C 型慢性肝炎における Direct Acting Antivirals 療法の臨床的特徴と実態 (2018)
  • 著者名/発表者名: 城下智、梅村武司、杉浦亜弓、山崎智生、藤森尚之、松本晶博、田中榮司
  • 学会等名: 第54回日本肝臓学会総会
• [学会発表] 肝硬変の成因別実態 (2018)
  • 著者名/発表者名: 杉浦亜弓、城下智、山崎智生、藤森尚之、木村岳史、小松通治、梅村武司、松本晶博、田中榮司
  • 学会等名: 第54回日本肝臓学会総会
• [学会発表] Ｂ型肝炎～HBs抗原陰性化を目指した治療戦略～ HBs抗原陰性化を目指して (2018)
  • 著者名/発表者名: 田中榮司
  • 学会等名: 第54回日本肝臓学会総会
  • 招待講演
• [学会発表] HCV関連肝癌の完全制御を目指したC型肝炎の基礎と臨床 HCV関連肝癌における宿主因子の検討：キラー細胞免疫グロブリン様受容体（KIR）とHLAについて (2018)
  • 著者名/発表者名: 梅村武司、城下智、田中榮司
  • 学会等名: JDDW2018
  • 招待講演
• [学会発表] 血清AutotaxinはC型慢性肝炎患者のDAAs治療による早期肝線維化改善を反映しうるか (2018)
  • 著者名/発表者名: 山崎智生、城下智、杉浦亜弓、藤森尚之、梅村武司、松本晶博、田中榮司
  • 学会等名: JDDW2018
• [学会発表] B型肝炎ウイルス感染のマネージメント TDF/Peg-IFN併用療法におけるHBsAg量低下に関わる因子の解析 (2018)
  • 著者名/発表者名: 松本晶博、城下智、田中榮司
  • 学会等名: JDDW2018
  • 招待講演
• [学会発表] 肝疾患と臓器相関 C 型肝炎の直接作用型抗ウイルス剤治療における脂質の量的変動プロファイルとアポリポ蛋白変動からみた脂質の質的変動に関する検討 (2018)
  • 著者名/発表者名: 城下智、梅村武司、田中榮司
  • 学会等名: 第42回日本肝臓学会東部会
  • 招待講演