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2018 年度 実績報告書

完全養殖系とゲノム編集技術を用いた海産魚における新規育種基盤技術の開発

研究課題

研究課題/領域番号 15H02459
研究機関九州大学

研究代表者

松山 倫也  九州大学, 農学研究院, 教授 (00183955)

研究分担者 北野 載  九州大学, 農学研究院, 助教 (30635008)
坂口 圭史  九州大学, 農学研究院, 准教授 (50396280)
長野 直樹  宮崎大学, 農学部, 教授 (50437943)
研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2019-03-31
キーワードゲノム編集 / 攻撃性 / 生殖 / TALEN / マサバ / カタクチイワシ
研究実績の概要

マサバに関して:標的遺伝子を生殖関連遺伝子から攻撃行動関連遺伝子(AVTR-V1a)に変更する研究方式の見直しを行い、F1世代を再度準備した上で、F2世代の作出・育成をやり直すことにした。平成30年度に作出したF1系統の内、両アレルに変異が導入された雌1尾と雄4尾を、令和元年度5月に交配させたが、卵質が悪く、受精卵を得られなかった。そこで、両アレルに変異が導入された雌1尾に対して、片アレルに変異が導入されたヘテロKOの雄8尾を交配に供した。その結果、F2世代の受精卵を得ることに成功した。遺伝子解析の結果、F2系統においては、1:1の割合でホモKO個体とヘテロKO個体が出現し、ホモKO個体21を得ることができた。
カタクチイワシに関して:黄体形成ホルモン(LH) を標的とし、TALENを用いたKO個体の作出を試みた。F0世代の遺伝子系を解析した結果、有効変異導入率は54.6%~100%であった。成熟体長に達したF0世代の生殖腺組織観察の結果、卵黄蓄積卵は認められたが、成熟卵はなかった。一方、野生型では最終成熟期(核移動)に達していた。また、野生型が産卵を行ったのに対し、変異導入群では産卵は認められなかったが、さらに、下垂体における遺伝子発現量を解析した結果、野生型と比較して変異導入群では雌雄ともにlhb が有意に減少していた。以上、カタクチイワシではlhb の機能欠損により雌が不妊化されることが示唆された。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2019

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (4件) (うち国際学会 2件、 招待講演 1件)

  • [雑誌論文] Comprehensive Experimental System for a Promising Model Organism Candidate for Marine Teleosts2019

    • 著者名/発表者名
      Sakaguchi K, Yoneda M, Sakai N, Nakashima K, Kitano H, Matsuyama M
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 9 ページ: 1、11

    • DOI

      https://doi.org/10.1038/ s41598-019-41468-8

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 魚の性格を変える 九州大学による“おとなしいマサバ開発”2019

    • 著者名/発表者名
      松山倫也, 大賀浩史
    • 雑誌名

      月刊養殖ビジネス

      巻: 56 ページ: 61,64

  • [学会発表] Production of AVTR-V1a2 knockout strain in chub mackerel, Scomber japonicus, by genome editing with TALEN.2019

    • 著者名/発表者名
      Sakanoue R, Ohga H, Shibata K, Nagano N, Kitano H, Sakaguchi K, Kuhara S, Tashiro K, Kim S, Nagasako T, Uchida S, Sakuma , Yamamoto T, Gen K, Fujiwara A, Kazeto Y, Kobayashi T, Ohta K, Matsuyama M
    • 学会等名
      Marine Biotechnology Conference 2019 in Shizuoka
    • 国際学会
  • [学会発表] Luteinizing hormone β-subunit gene knockout in Japanese anchovy (Engraulis japonicus) by TALEN-based genome editing2019

    • 著者名/発表者名
      Kai S, Sakaguchi K, Ohta K, Matsuyama M
    • 学会等名
      Marine Biotechnology Conference 2019 in Shizuoka
    • 国際学会
  • [学会発表] 新奇モデル生物としてのカタクチイワシ-その特徴と将来展望-2019

    • 著者名/発表者名
      3.坂口圭史,米田道夫,酒井則良,甲斐公士,太田耕平,大賀浩史,松山倫也
    • 学会等名
      平成31年度日本水産学会春季大会
  • [学会発表] ゲノム編集技術を利用した魚類の育種と利用2019

    • 著者名/発表者名
      松山倫也
    • 学会等名
      令和元年度水産育種情報交換会
    • 招待講演

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公開日: 2021-01-27  

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