| 研究課題/領域番号 |
15H02563
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| 研究機関 | 弘前大学 |
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研究代表者 |
大山 力 弘前大学, 医学研究科, 教授 (80282135)
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| 研究分担者 |
羽渕 友則 秋田大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (00293861)
畠山 真吾 弘前大学, 医学部附属病院, 講師 (10400136)
坪井 滋 弘前大学, 医学研究科, 研究員 (20526727)
盛 和行 弘前大学, 医学研究科, 助教 (40266903)
米山 徹 弘前大学, 医学研究科, 助教 (50587649)
古家 琢也 弘前大学, 医学研究科, 准教授 (60321965)
橋本 安弘 弘前大学, 医学研究科, 准教授 (60322939)
飛澤 悠葵 弘前大学, 医学研究科, 助教 (70623768)
米山 高弘 弘前大学, 医学部附属病院, 講師 (90374834)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 前立腺癌 / 腫瘍マーカー / 糖鎖 |
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| 研究実績の概要 |
S2,6-PSAとは、正常者あるいは前立腺肥大症に多く存在するPSAで、糖鎖末端のシアル酸の結合がα2-6結合であるPSAのことを示す。S2,3-PSAとは、前立腺癌患者に多く存在するPSAで、糖鎖末端のシアル酸の結合がα2-3結合であるPSAのことを示す。我々は、2004年にPSA糖鎖の癌性医変異構造を明らかにし、2014年に測定系を構築し、上記癌性糖鎖PSAの測定が前立腺癌の診断を飛躍的に改善する可能性があることを示した。
そこで、上記癌性糖鎖PSAの商品化を実施すべく、ミュータスワコーｉ30を用いた測定系を開発した。ミュータスワコーｉ30は、プラスチック基板上に微細流路中を配したマイクロチップを用いて、微細流路中で等速電気泳動によるサンプル濃縮を実施し、その後レクチン親和性電気泳動を行うシステムである。本測定系の場合は、S2,6-PSAとS2,3-PSAの分離を行い、遊離型PSA（free PSA）総量に占めるS2,3-PSAの割合を求めた。本年度は、S2,3-PSAの遊離型PSAに占める割合を測定することにより、PSAテストの問題であった特異度の改善（前立腺肥大症と前立腺癌の切り分け）が可能と考え、検討を行った。その結果、現行の前立腺癌のスクリーニング方法であるPSAやフリーPSA（％）を遥かに凌ぐAUC0.8580というデータを得るに至った。
また、前立腺癌の診断におけるLacdiNAc-PSA(PSA-Gi)の意義について臨床検体を用いて検討し、従来のPSA法を遥かに凌駕する診断精度であることを確認した。PSA-Giも従来のPSAに代わって、前立腺癌の診断マーカーとして臨床応用される可能性が高い。また、前立腺癌悪性度判定法としては、PSA-Giを検出するWFAレクチンによる免疫組織化学染色によって、新規判定法を開発して特許申請を行った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本年度はS2,3-PSAを定量する新規アッセイ法として、ミュータスワコーｉ30を用いた測定系を開発した。現行の前立腺癌のスクリーニング方法であるPSAやフリーPSA（％）を遥かに凌ぐAUC0.8580というデータが得られ、次年度以降に外部サンプルを用いたvalidation studyが実施可能になった。
また、別のアッセイシステムとしてSPSF法によりLacdiNAc-PSA(PSA-Gi)の意義について臨床検体を用いて検討し、従来のPSA法を遥かに凌駕する診断精度であることを確認した。こちらも外部サンプルを使用したvalidation studyが可能なフェーズに導くことができた。
また、前立腺癌悪性度判定法としては、PSA-Giを検出するWFAレクチンによる免疫組織化学染色によって、新規判定法を開発して特許申請を行った。以上の成果を基に、おおむね順調に進展していると判断した。
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| 今後の研究の推進方策 |
【1】PSA糖鎖の癌性変異を利用した診断マーカーの実用化
平成28年度同様、以下の1)2)3)を継続しつつ、4)の前向き研究の準備を進める。
1)外部サンプルを使用したvalidation study（PSA, % free PSAとの比較）、2)国外の 血清サンプルを使用した国際比較研究（PSA, % free PSAとの比較）3) PSA糖鎖癌性変 異標準分子(S2,3 PSA)の安定供給・検量線作成・汎用キット化、4)前立腺癌スクリーニ ングにける糖鎖標的新規アッセイシステムの有用性に関する前向き研究：青森県、秋田 県、宮城県、山形県で行っている前立腺癌検診においてTotal PSA、Free/Total PSA
ratio、および糖鎖標的アッセイ法の感度と特異度を評価する
【2】core 2 O-グリカンとその合成酵素(C2GnT)およびWFAレクチンで検出されるLacdiNAcを標的にした悪性度マーカーの実用化：平成28年度同様、以下の検討を行う。1)血清、 尿、精液をサンプルにしたELISA系のアッセイ系樹立 2)C2GnTおよびLacdiNAcと前立腺 癌症例のPSA再発に関する後ろ向き検討:治療前のC2GnT発現を生検標本の免疫組織染色 による判定量系、射出精液、血清、前立腺マッサージ後の尿を用いたELSA系で評価し、 PSA再発との関連性を後ろ向きに検討する。3)active surveillance選択基準としての C2GnTおよびLacdiNAcの臨床的意義の確認:active surveillanceを行っている症例に関 して、C2GnTおよびLacdiNAcの発現を生検標本の免疫組織染色による半定量系、射出精 液、血清、前立腺マッサージ後の尿を 用いたELSA系で評価し、検討を行う。
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