紫外線誘発皮膚癌発生における損傷乗り越えDNA複製の関与とそのメカニズムの解明

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15H02822
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 村雲 芳樹 北里大学, 医学部, 教授 (40324438)
• 研究分担者: 櫻井 靖高 北里大学, 医学部, 助教 (50733101) ; 一戸 昌明 北里大学, 医学部, 講師 (80365163)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 紫外線誘発皮膚癌 / Rev7トランスジェニックマウス / Rev7コンディショナルノックアウトマウス / REV7ノックダウン / 悪性黒色腫

研究実績の概要

皮膚癌好発系Polh-/-マウスと皮膚特異的高発現を示すRev7トランスジェニック（K14-Rev7TG）マウスを交配させた場合、腫瘍発生が早くなる可能性があるため、前年度作成したプロトコールより照射量・回数を減らして腫瘍発生が遅くなるプロトコールを作成した。2 kJ/m2/dayを週１回照射したところ、腫瘍の発生時期をおよそ８週間遅らせることに成功した。そのため以降の実験は、2 kJ/m2/dayの紫外線を週１回照射することに決定した。それと平行して、Polh-/- K14-Rev7TGマウスを樹立するために、Polh+/-マウスとPolh+/- K14-Rev7TG+マウスの交配を行ったが、妊娠率が非常に悪く、目的のマウスが得られなかった。そのため、K14-Rev7TG+マウスの別系統も用いて、交配方法を工夫しながらPolh-/- K14-Rev7TG+マウスの樹立を継続している。
一方、胎生致死となるRev7-/-マウスの代わりにRev7コンディショナルノックアウトマウスを用いることにし、皮膚特異的にREV7を欠失させるために皮膚特異的にCreを発現するトランスジェニックマウスの作成を行った。K14プロモーター下にCre遺伝子を発現するベクターを作成し、マウスの作成を北里大学遺伝子高次機能解析センターに依頼した。F０マウスが計３７匹得られたため、現在トランスジーンを有する個体を選別している。
悪性黒色腫の培養細胞株を用いたin vitroの解析として、REV7をノックダウンした細胞株を樹立した。その細胞株とコントロール細胞株を用いて、細胞増殖能、移動能、浸潤能を検討した結果、REV7をノックダウンした細胞株は優位に細胞増殖能、移動能、浸潤能が低くなることが判明した。臨床検体を用いた解析と併せて、REV7発現が悪性黒色腫の病期の進行に関与している可能性が示唆された。

現在までの達成度 (段落)

平成29年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成29年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Prognostic significance of S100A16 sub-cellular localization in lung adenocarcinoma. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi M, Nagashio R, Saito K, Aguilar-Bonavides C, Ryuge S, Katono K, Igawa S, Tsuchiya B, Jiang SX, Ichinoe M, Murakumo Y, Saegusa M, Satoh Y, Sato Y.
  • 雑誌名: Hum Pathol 巻: 74 ページ: 148-155
  • DOI: 10.1016/j.humpath.2018.01.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Basigin expression as a prognostic indicator in stage I pulmonary adenocarcinoma. (2018)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto T, Nagashio R, Ryuge S, Igawa S, Kobayashi M, Fukuda E, Goshima N, Ichinoe M, Jiang SX, Satoh Y, Masuda N, Murakumo Y, Saegusa M, Sato Y.
  • 雑誌名: Pathol Int 巻: 68 ページ: 232-240
  • DOI: 10.1111/pin.12646
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cytoskeleton-Associated Protein 4 Is a Novel Serodiagnostic Marker for Lung Cancer. (2018)
  • 著者名/発表者名: Yanagita K, Nagashio R, Jiang SX, Kuchitsu Y, Hachimura K, Ichinoe M, Igawa S, Fukuda E, Goshima N, Satoh Y, Murakumo Y, Saegusa M, Sato Y.
  • 雑誌名: Am J Pathol 巻: 188 ページ: 1328-1333
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2018.03.007
• [雑誌論文] Prognostic significance of G6PD expression and localization in lung adenocarcinoma. (2018)
  • 著者名/発表者名: Nagashio R, Oikawa S, Yanagita K, Hagiuda D, Kuchitsu Y, Igawa S, Naoki K, Satoh Y, Ichinoe M, Murakumo Y, Saegusa M, Sato Y.
  • 雑誌名: Biochim Biophys Acta Proteins Proteom 巻: 1867 ページ: 38-46
  • DOI: 10.1016/j.bbapap.2018.05.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD109 deficiency induces osteopenia with an osteoporosis-like phenotype in vivo. (2018)
  • 著者名/発表者名: Mii S, Hoshino A, Enomoto A, Murakumo Y, Ito M, Yamaguchi A, Takahashi M.
  • 雑誌名: Genes Cells 巻: 23 ページ: 590-598
  • DOI: 10.1111/gtc.12593
  • 査読あり
• [雑誌論文] CD109, a negative regulator of TGF-β signaling, is a putative risk marker in diffuse large B-cell lymphoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama M, Ichinoe M, Okina S, Sakurai Y, Nakada N, Yanagisawa N, Jiang SX, Numata Y, Umezawa A, Miyazaki K, Higashihara M, Murakumo Y.
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 105 ページ: 614-622
  • DOI: 10.1007/s12185-016-2173-1
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of EGFR-Tyrosine Kinase Inhibitors on Postoperative Recurrent Non-Small-Cell Lung Cancer Harboring EGFR Mutations. (2017)
  • 著者名/発表者名: Igawa S, Ryuge S, Ichinoe M, Nakashima H, Otani S, Nakahara Y, Fukui T, Sasaki J, Kubota M, Katagiri M, Murakumo Y, Satoh Y, Sato Y, Masuda N.
  • 雑誌名: Oncol Res Treat 巻: 40 ページ: 7-13
  • DOI: 10.1159/000455147
  • 査読あり
• [雑誌論文] Impact of PD-L1 Expression in Patients with Surgically Resected Non-Small-Cell Lung Cancer. (2017)
  • 著者名/発表者名: Igawa S, Sato Y, Ryuge S, Ichinoe M, Katono K, Hiyoshi Y, Otani S, Nagashio R, Nakashima H, Katagiri M, Sasaki J, Murakumo Y, Satoh Y, Masuda N.
  • 雑誌名: Oncology 巻: 92 ページ: 283-290
  • DOI: 10.1159/000458412
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prognostic significance of nestin expression in patients with resected non-small cell lung cancer treated with platinum-based adjuvant chemotherapy; relationship between nestin expression and epithelial to mesenchymal transition related markers. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ryuge S, Sato Y, Nagashio R, Hiyoshi Y, Katono K, Igawa S, Nakashima H, Shiomi K, Ichinoe M, Murakumo Y, Saegusa M, Satoh Y, Masuda N.
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 12 ページ: e0173886
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0173886
  • 査読あり
• [雑誌論文] Significance of perivascular tumour cells defined by CD109 expression in progression of glioma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Shiraki Y, Mii S, Enomoto A, Momota H, Han YP, Kato T, Ushida K, Kato A, Asai N, Murakumo Y, Aoki K, Suzuki H, Ohka F, Wakabayashi T, Todo T, Ogawa S, Natsume A, Takahashi M.
  • 雑誌名: J Pathol. 巻: 243 ページ: 468-480
  • DOI: 10.1002/path.4981
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinicopathological Significance of S100A14 Expression in Lung Adenocarcinoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Katono K, Sato Y, Kobayashi M, Saito K, Nagashio R, Ryuge S, Igawa S, Nakashima H, Shiomi K, Satoh Y, Ichinoe M, Murakumo Y, Saegusa M, Masuda N.
  • 雑誌名: Oncol Res Treat 巻: 40 ページ: 594-602
  • DOI: 10.1159/000478100
  • 査読あり
• [雑誌論文] S100A16, a promising candidate as a prognostic marker for platinum-based adjuvant chemotherapy in resected lung adenocarcinoma. (2017)
  • 著者名/発表者名: Katono K, Sato Y, Kobayashi M, Nagashio R, Ryuge S, Igawa S, Ichinoe M, Murakumo Y, Saegusa M, Masuda N.
  • 雑誌名: Onco Targets Ther 巻: 10 ページ: 5273-5279
  • DOI: 10.2147/OTT.S145072
  • 査読あり
• [学会発表] GPIアンカー型蛋白CD109の肺扁平上皮癌細胞における発現意義の解析 (2018)
  • 著者名/発表者名: 村雲芳樹、七浦奈都実、櫻井靖高、一戸昌明
  • 学会等名: 第１０７回日本病理学会総会
• [学会発表] REV7の発現抑制は抗癌剤抵抗性胚細胞腫瘍のシスプラチン感受性を増強する (2018)
  • 著者名/発表者名: 櫻井靖高、仲田典広、高橋雅英、村雲芳樹
  • 学会等名: 第１０７回日本病理学会総会
• [学会発表] 食道扁平上皮癌におけるCD109の発現検討：接着因子との関連 (2018)
  • 著者名/発表者名: 一戸昌明、村雲芳樹、梅沢敦子
  • 学会等名: 第１０７回日本病理学会総会
• [学会発表] 肺腺癌におけるNAP1L1の予後予測マーカーとしての有用性について (2018)
  • 著者名/発表者名: 長塩亮、萩生田大介、朽津有紀、柳田憲吾、鉢村和男、土屋紅緒、一戸昌明、村雲芳樹、蒋世旭、佐藤雄一
  • 学会等名: 第１０７回日本病理学会総会
• [学会発表] Suppression of REV7, the regulatory subunit of Polz, sensitizes drug-resistant germ cell tumors to chemotherapy (2018)
  • 著者名/発表者名: 櫻井靖高、仲田典広、高橋雅英、村雲芳樹
  • 学会等名: 第７７回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Molecular mechanism of transcriptional regulation of REV7, which is involved in the DNA damage tolerance mechanism (2018)
  • 著者名/発表者名: 村雲芳樹、櫻井靖高
  • 学会等名: 第７７回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Mechanism of pattern formation of cancer cell invasion (2018)
  • 著者名/発表者名: 加藤琢哉、村雲芳樹、Jenkins Robert、Sahai Erik
  • 学会等名: 第７７回日本癌学会学術総会
• [学会発表] ハイリスク前立腺癌に対するネオアジュバントHSV-tk 遺伝子治療例の病理組織学的検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 柳澤信之、佐藤威文、田畑健一、津村秀康、Thompson Thimothy C、岡安勲、村雲芳樹、馬場志郎、岩村正嗣
  • 学会等名: 第１０６回日本病理学会総会
• [学会発表] 慢性皮膚炎症を伴うCD109 ノックアウトマウスにおいて皮膚腫瘍形成は抑制される (2017)
  • 著者名/発表者名: 三井伸二、砂川真輝、榎本篤、村雲芳樹、梛野正人、高橋雅英
  • 学会等名: 第１０６回日本病理学会総会
• [学会発表] In situ hybridization 法を用いた非小細胞肺癌組織におけるmiR-205 の発現の検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 土屋紅緒、蒋世旭、長塩亮、村雲芳樹、三枝信、佐藤雄一
  • 学会等名: 第１０６回日本病理学会総会
• [学会発表] GPIアンカー型蛋白CD109の肺扁平上皮癌細胞における発現意義の解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 七浦奈都実、櫻井靖高、島田裕子、村雲芳樹
  • 学会等名: 第１０６回日本病理学会総会
• [学会発表] REV7 expression is associated with prognosis and cisplatin sensitivity in human malignancy. (2017)
  • 著者名/発表者名: Yoshiki Murakumo, Kaoru Niimi, Okina Sosei
  • 学会等名: The 2nd EACR-AACR-SIC Special Conference “The Challenges of Optimising Immuno and Targeted Therapies: From Cancer Biology to the Clinic”
  • 国際学会
• [学会発表] Characterization of the Promoter Region of DNA Repair Protein REV7 (2017)
  • 著者名/発表者名: 島田裕子、櫻井靖高、村雲芳樹
  • 学会等名: 第７６回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Depletion of REV7 sensitizes testicular germ cell tumors to chemotherapy (2017)
  • 著者名/発表者名: 櫻井靖高、仲田典広、高橋雅英、村雲芳樹
  • 学会等名: 第７６回日本癌学会学術総会
• [学会発表] Significance of CD109 expression in lung squamous cell carcinoma cells (2017)
  • 著者名/発表者名: 七浦奈都実、櫻井靖高、村雲芳樹
  • 学会等名: 第７６回日本癌学会学術総会
• [学会発表] ヒトREV7の抑制は抗癌剤抵抗性胚細胞腫瘍のシスプラチン感受性を増強する (2017)
  • 著者名/発表者名: 櫻井靖高、吉田和樹、仲田典広、高橋雅英、村雲芳樹
  • 学会等名: 第40回日本分子生物学会年会