研究課題
今年度は、出芽酵母の必須遺伝子破壊株の解析を行った。研究材料として1,112ある必須遺伝子全てについて２倍体で２コピーある遺伝子のうち１コピーのみ破壊された株（ヘテロ２倍体）を用いた。実験方法としては、顕微鏡に基づく高次元表現型情報が取得できるCalMorph画像解析ソフトを用いて、細胞形態、アクチン、核DNAの形態情報を取得した後、501ある表現型パラメータそれぞれに最も適した確率分布を決定し、一般化線形モデルに組み込んで形態データを標準化して高次元表現型解析を行った。優性遺伝子と劣性遺伝子の両方を持つヘテロ二倍体では、多くの場合優性遺伝子が支配する形質が表現型となり、これはメンデルの「優性の法則（第一法則）」と呼ばれている。ただし、ごく少数ながら明らかな例外があることが知られており、それはハプロ不全性と呼ばれてきた。つまりハプロ不全性を示す遺伝子では劣性側の表現型が現れてくる。ショウジョウバエの羽の形態を指標にした場合には6%、出芽酵母の増殖を指標にした場合には8%程度ハプロ不全性が観察されていた。今回、501の観点から出芽酵母のヘテロ二倍体必須遺伝子破壊株の形態表現型を一般化線形モデルに組み込んで解析したところ、全体の約半数にあたる657の必須遺伝子でハプロ不全性が認められた（FDR=0.01）。不適切な統計処理の結果としてこのような高い頻度のハプロ不全性が認められたのでないことは、100回以上繰り返し取得した野生型酵母のデータでは、そのような形態異常株が検出されないことから明らかになった。さらに、①調べる表現型の観点を501まで増やした結果として高い頻度のハプロ不全性が認められたこと、②ランダムに選抜した100の非必須遺伝子で調べると33%しかハプロ不全性が認められないことから、超高次元の表現型解析をにより、高い頻度のハプロ不全性が見られたことが示された。
2: おおむね順調に進展している
高速高次元CalMorphシステムを使うとともに一般化線形モデルを導入して、より質の高い必須遺伝子破壊株のヘテロ二倍体の高次元表現型解析を行うことが予定通り、可能になった。
引き続き研究テーマ１である、「出芽酵母の必須遺伝子に関する遺伝情報による動作原理の研究」を行うとともに、研究テーマ２である「化学遺伝学的アプローチによる遺伝情報による動作原理の研究」について研究を進める。
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