炎症・免疫・上皮バリアにおける生理活性脂質受容体の役割

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15H04708
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 横溝 岳彦 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60302840)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: 生理活性 / 生体分子 / シグナル伝達

研究実績の概要

1)臓器・細胞特異的なBLT1欠損マウスの樹立と解析：BLT1flox/floxマウスを樹立した。CD11c-Creマウスと交配し、樹状細胞特異的BLT1欠損マウスを樹立した。
2)BLT1発現が規定する抗原提示細胞サブセット解析：BLT1発現で規定される樹状細胞とマクロファージサブセットの遺伝子発現・生理活性脂質産生の違いを解析した。また、サブセット間でロイコトリエンB4をはじめとした生理活性脂質の産生プロファイルに大きな違いがあることを見いだし、論文発表を行った。
3)上皮細胞におけるBLT2の役割の解明：前年度に見いだした、BLT2受容体による肺保護作用についてより詳細な検討を行った。BLT2とCysLT1の両者、あるいは一方のみを過剰発現させた細胞を用いた実験で、BLT2発現がCysLT1のタンパク質としての発現量を増加させ、CysLT1下流のシグナルを強めていることを明らかにした。このCysLT1タンパク質の安定化は、ユビキチン・プロテオソーム系を介したCysLT1の分解の抑制に依存していることを見いだした。
4)生理活性脂質産生酵素欠損マウスの樹立と解析：CRSPR/Cas9システムを用いて、LTB4産生酵素(LTA4水解酵素)を欠損したマウスを作製したところ、本マウスに「痩せ」の表現型をみいだした。本酵素の産生産物であるLTB4受容体BLT1の欠損マウスでは、この「痩せ」の表現型が観察されなかったことから、LTA4水解酵素が有するアミノペプチダーゼ活性の消失が、「痩せ」の表現型につながっていることが示唆された。そのため、LTB4産生能が正常で、アミノペプチダーゼ活性だけが消失した変異LTA4水解酵素の作出を試み、その樹立に成功した。

現在までの達成度 (段落)

29年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

29年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [国際共同研究] ハーバード大学/コロラド大学デンバー校/Scripps研究所(米国)
  • 国名: 米国
  • 外国機関名: ハーバード大学/コロラド大学デンバー校/Scripps研究所
  • 他の機関数: 2
• [国際共同研究] Shanghai Jiao Tong University(中国)
  • 国名: 中国
  • 外国機関名: Shanghai Jiao Tong University
• [雑誌論文] Na+-mimicking ligands stabilize the inactive state of leukotriene B4 receptor BLT1 (2018)
  • 著者名/発表者名: Hori Tetsuya、Okuno Toshiaki、Hirata Kunio、Yamashita Keitaro、Kawano Yoshiaki、Yamamoto Masaki、Hato Masakatsu、Nakamura Motonao、Shimizu Takao、Yokomizo Takehiko、Miyano Masashi、Yokoyama Shigeyuki
  • 雑誌名: Nat Chem Biol 巻: 14 ページ: 262～269
  • DOI: 10.1038/nchembio.2547
  • 査読あり
• [雑誌論文] The Relationship between TP53 Gene Status and Carboxylesterase 2 Expression in Human Colorectal Cancer (2018)
  • 著者名/発表者名: Ishimine Momoko、Lee Hyeon-Cheol、Nakaoka Hirofumi、Orita Hajime、Kobayashi Toshiyuki、Mizuguchi Konomi、Endo Mikumi、Inoue Ituro、Sato Koichi、Yokomizo Takehiko
  • 雑誌名: Dis Markers 巻: 2018 ページ: 1～7
  • DOI: 10.1155/2018/5280736
  • 査読あり
• [雑誌論文] Leukotriene B4 receptor 2 regulates the proliferation, migration, and barrier integrity of bronchial epithelial cells (2018)
  • 著者名/発表者名: Liu Min、Shen Juan、Yuan Huimin、Chen Fengling、Song Huaidong、Qin Hui、Li Yanqin、Xu Jiabo、Ye Qing、Li Shenxian、Saeki Kazuko、Yokomizo Takehiko
  • 雑誌名: J Cell Physiol 巻: In press ページ: In press
  • DOI: 10.1002/jcp.26455
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Altered eicosanoid production and phospholipid remodeling during cell culture (2018)
  • 著者名/発表者名: Okuno, T., Gijon, M. A., Zarini, S., Martin, S. A., Barkley, R. M., Johnson, C. A., Ohba, M., Yokomizo, T.,Murphy, R. C.
  • 雑誌名: J Lipid Res 巻: 59 ページ: 542-549
  • DOI: 10.1194/jlr.M083030
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Leukotriene receptors as potential therapeutic target (2018)
  • 著者名/発表者名: Yokomizo, T., Nakamura, M.,Shimizu, T.
  • 雑誌名: J Clin Invest 巻: In press ページ: 印刷中
  • 査読あり
• [雑誌論文] Profiling of bioactive lipids in different dendritic cell subsets using an improved multiplex quantitative LC-MS/MS method (2018)
  • 著者名/発表者名: Ohba, M., Saeki, K., Koga, T., Okuno, T., Konbayashi, Y.,Yokomizo, T.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 巻: In press ページ: 印刷中
• [雑誌論文] Non-steroidal anti-inflammatory drug delays corneal wound healing by reducing production of 12-hydroxyheptadecatrienoic acid, a ligand for leukotriene B4 receptor 2 (2017)
  • 著者名/発表者名: Iwamoto Satoshi、Koga Tomoaki、Ohba Mai、Okuno Toshiaki、Koike Masato、Murakami Akira、Matsuda Akira、Yokomizo Takehiko
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 7 ページ: 13267
  • DOI: 10.1038/s41598-017-13122-8
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Identification, signaling, and functions of LTB 4 receptors (2017)
  • 著者名/発表者名: Saeki Kazuko、Yokomizo Takehiko
  • 雑誌名: Semin Immunol 巻: 33 ページ: 30～36
  • DOI: 10.1016/j.smim.2017.07.010
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Biochemical and immunological characterization of a novel monoclonal antibody against mouse leukotriene B4 receptor 1 (2017)
  • 著者名/発表者名: Sasaki Fumiyuki、Koga Tomoaki、Saeki Kazuko、Okuno Toshiaki、Kazuno Saiko、Fujimura Tsutomu、Ohkawa Yasuyuki、Yokomizo Takehiko
  • 雑誌名: PLoS One 巻: 12 ページ: e0185133
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0185133
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Dioxin-induced increase in leukotriene B4 biosynthesis through the aryl hydrocarbon receptor and its relevance to hepatotoxicity owing to neutrophil infiltration (2017)
  • 著者名/発表者名: Takeda, T., Komiya, Y., Koga, T., Ishida, T., Ishii, Y., Kikuta, Y., Nakaya, M., Kurose, H., Yokomizo, T., Shimizu, T., Uchi, H., Furue, M.,Yamada, H.
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 292 ページ: 10586-10599
  • DOI: 10.1074/jbc.M116.764332
  • 査読あり
• [雑誌論文] Urinary prostaglandin D2 metabolite excretion during the first six months of life was significantly lower in breast-fed than formula-fed infants (2017)
  • 著者名/発表者名: Shoji Hiromichi、Ikeda Naho、Kitamura Tomohiro、Suganuma Hiroki、Ohba Mai、Okuno Toshiaki、Yokomizo Takehiko、Shimizu Toshiaki
  • 雑誌名: Acta Paediatr 巻: 107 ページ: 95～100
  • DOI: 10.1111/apa.14068
  • 査読あり
• [学会発表] マウスアレルギー性結膜炎モデルにおけるレゾルビンの効果 (2017)
  • 著者名/発表者名: 岩本怜、 岡野美樹子、 横溝岳彦、 村上晶、松田彰
  • 学会等名: 第121回日本眼科学会
• [学会発表] マウス眼球部位別の脂質の網羅的脂肪酸分子種解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 平形寿彬、 李賢哲、 村上晶、 松田彰、横溝岳彦
  • 学会等名: 第121回日本眼科学会
• [学会発表] The effect of dietary omega-3 fatty acids on allergic conjunctivitis in mice. (2017)
  • 著者名/発表者名: Hirakata、 T.、 Lee、 C. H.、 Ohba、 M.、 Matsuda、 A.、 Murakami、 A.、Yokomizo、 T.
  • 学会等名: ARVO 2017
  • 国際学会
• [学会発表] 12-HHT/BLT2 axis protects against pneumolysin-dependent acute lung injury (2017)
  • 著者名/発表者名: Saeki、 K.、 Shigematsu、 M.、 Koga、 T.、 Ohba、 M.、 Okuno、 T.、Yokomizo、 T.
  • 学会等名: Keystone Symposium、 Integrating Metabolism and Immunity
  • 国際学会
• [学会発表] LC-MS/MSを用いた簡便な遊離脂肪酸測定法の開発 (2017)
  • 著者名/発表者名: 李賢哲、 濱弘太郎、 横山和明、横溝岳彦
  • 学会等名: 第59回日本脂質生化学会
• [学会発表] 静脈麻酔薬プロポフォールは5リポキシゲナーゼに直接結合しロイコトリエンB4産生を抑制する (2017)
  • 著者名/発表者名: 奥野利明、 大塲麻生、 Chamberlain、 M.、 Bu、 W.、 Liu、 F.-Y.、 Eckenhoff、 R. G.、 横溝岳彦、結城公一
  • 学会等名: 第59回日本脂質生化学会
• [学会発表] BLT2受容体の上皮保護作用 (2017)
  • 著者名/発表者名: 横溝岳彦
  • 学会等名: 第38回日本炎症・再生学会 (シンポジウム)
  • 招待講演
• [学会発表] 12-HHT/BLT2 axis protects acute lung injury (2017)
  • 著者名/発表者名: Yokomizo、 T.
  • 学会等名: 58th International Conference on the Bioscience of Lipids
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] 長期間の高強度持久的運動トレーニングによる骨格筋内のアシルカルニチン分子種濃度の変動 (2017)
  • 著者名/発表者名: 川西範明、 高木香奈、 李賢哲、 奥野利明、 横溝岳彦、町田修一
  • 学会等名: 第72回日本体力医学会大会
• [学会発表] 生理活性脂質研究の醍醐味 (2017)
  • 著者名/発表者名: 横溝岳彦
  • 学会等名: 57回日本臨床化学会総会 特別講演
  • 招待講演
• [学会発表] C-terminal region of BLT2 receptor restricts its localization to the lateral membrane (2017)
  • 著者名/発表者名: Hara、 T.、 Saeki、 K.、Yokomizo、 T.
  • 学会等名: 15th International Conference on Bioactive Lipids in Cancer, Inflammation and Related Diseases
  • 国際学会
• [学会発表] Intravenous anesthetic propofol binds to 5-lipoxygenase and attenuates LTB4 production in vivo and in vitro (2017)
  • 著者名/発表者名: Okuno、 T.、 Koutsogiannaki、 S.、 Ohba、 M.、 Chamberlain、 M.、 Bu、 W.、 Lin、 F.-Y.、 Eckenhoff、 R. G.、 Yokomizo
  • 学会等名: 15th International Conference on Bioactive Lipids in Cancer, Inflammation and Related Diseases
  • 国際学会
• [学会発表] Role of LTB4-BLT1 signaling in mice pain model following hind paw incision (2017)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto、 Y.、 Asahara、 M.、 Ito、 N.、 Yamada、 Y.、 Yokomizo、 T.、Shimizu、 T.
  • 学会等名: 15th International Conference on Bioactive Lipids in Cancer, Inflammation and Related Diseases
  • 国際学会
• [学会発表] Dietary omega-3 fatty acids alleviate the allergic conjunctivitis in mice (2017)
  • 著者名/発表者名: Hirakata、 T.、 Lee、 C. H.、 Ohba、 M.、 Okuno、 T.、 Matsuda、 A.、 Murakami、 A.、Yokomizo、 T.
  • 学会等名: 15th International Conference on Bioactive Lipids in Cancer, Inflammation and Related Diseases
  • 国際学会
• [学会発表] Biological roles of BLT receptors (2017)
  • 著者名/発表者名: Yokomizo、 T.
  • 学会等名: 15th International Conference on Bioactive Lipids in Cancer, Inflammation and Related Diseases
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] 麻酔薬プロポフォールの抗炎症作用機序の解明 (2017)
  • 著者名/発表者名: 奥野利明、 横溝岳彦、結城公一
  • 学会等名: 第14回東京呼吸器リサーチフォーラム
• [学会発表] ロイコトリエンB4第一受容体BLT1による免疫活性化機構の解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 古賀友紹、 佐々木文之、 佐伯和子、 奥野利明、 中尾光善、横溝岳彦
  • 学会等名: 2017年度生命科学系学会合同年次大会(ConBio2017)
• [学会発表] 薬物代謝酵素カルボキシルエステラーゼのヒト大腸癌における発現調節機構の解明 (2017)
  • 著者名/発表者名: 伊志嶺百々子、 李賢哲、 折田創、 遠藤未来美、 水口このみ、 佐藤浩一、 中岡博史、 井ノ上逸朗、横溝岳彦
  • 学会等名: 2017年度生命科学系学会合同年次大会(ConBio2017)
• [学会発表] トリグリセリド減少効果を有するサプリメントの複数同時添加による効果の検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 泉宜秀、 李賢哲、横溝岳彦
  • 学会等名: 2017年度生命科学系学会合同年次大会(ConBio2017)
• [学会発表] ロイコトリエンA4水解酵素の代謝における解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 鵜澤博嗣、 古賀友紹、 佐伯和子、 宮塚健、 綿田裕孝、横溝岳彦
  • 学会等名: 2017年度生命科学系学会合同年次大会(ConBio2017)
• [学会発表] BLT2のC末端領域はBLT2の細胞間接着部位への局在に重要である (2017)
  • 著者名/発表者名: 原琢弥、 佐伯和子、横溝岳彦
  • 学会等名: 2017年度生命科学系学会合同年次大会(ConBio2017)
• [学会発表] 静脈麻酔薬プロポフォールは5-リポキシゲナーゼに結合してロイコトリエンの産生を抑制する (2017)
  • 著者名/発表者名: 奥野利明、 Koutsogiannaki、 S.、 大塲麻生、 Chamberlain、 M.、 Bu、 W.、 Lin、 F.-Y.、 Eckenhoff、 R.、 横溝岳彦、結城公一
  • 学会等名: 2017年度生命科学系学会合同年次大会(ConBio2017)
• [学会発表] A fatty acid 12-hydroxyheptadecatrienoic acid accelerates corneal wound healing through leukotriene B4 receptor 2, BLT2 (2017)
  • 著者名/発表者名: Yokomizo、 T.、 Iwamoto、 S.、 Koga、 T.、 Ohba、 M.、 Okuno、 T.、 Koike、 M.、 Murakami、 A.、Matsuda、 A.
  • 学会等名: Keystone Symposium, GPCR Structure and Function
  • 国際学会
• [学会発表] 12-hydroxyheptadecatrienoic acid accelerates epithelial wound healing through leukotriene B4 receptor 2, BLT2 (2017)
  • 著者名/発表者名: Yokomizo、 T.
  • 学会等名: Keystone Symposium, the resolution of inflammation in health and disease
  • 国際学会
• [備考] 順天堂大学生化学第一講座のホームページ
  • URL: http://plaza.umin.ac.jp/j_bio/
• [備考] プレスリリース：角膜上皮障害の修復メカニズムを解明
  • URL: http://www.juntendo.ac.jp/news/20171016-01.html
• [備考] プレスリリース：ロイコトリエンB4受容体の構造 －GPCRに対する逆作動薬探索の効率化に向けて－
  • URL: http://www.juntendo.ac.jp/news/20180109-01.html