遺伝子改変ウサギモデルによる動脈硬化の発生におけるアポ蛋白ＣＩＩＩの機能解析

2016 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15H04718
• 研究機関: 山梨大学
• 研究代表者: 範 江林 山梨大学, 総合研究部, 教授 (60272192)
• 研究分担者: 北嶋 修司 佐賀大学, 総合分析実験センター, 准教授 (70284643)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: 動脈硬化 / 高脂血症 / ウサギモデル

研究実績の概要

1.アポEノックアウト（KO)ウサギの解析を完了させ、すでに2016年にAtherosclerosisに発表している。アポEの欠損は、ウサギの血漿カイロミクロンやVLDLの代謝に大きく影響しており、特に高コレステロール食餌の負荷により高脂血症を更に増悪させ、動脈硬化の形成をも促進させる。現在はアポE欠損による糖代謝並びにインスリン代謝に対する影響の有無についての検討を行っている。
2.CETP・KOウサギを用いた研究では、昨年度に引き続いて脂質代謝や動脈硬化の解析を行った。通常食事下での血漿脂質代謝の変化（総コレステロールとHDL-Cの上昇)の分子機序を明らかにするとともに、高コレステロール食下でのCETP欠損による脂質代謝の変化や動脈硬化の発生への影響についてのメカニズムを同定した。これらの研究結果を纏め、2017年にArteriolerscl.Thromb. Vasc. Biol.誌に発表している。
3．アポCIII欠損ウサギの繁殖は、動物実験施設の感染事故の影響でかなり遅れているが、現在はヘテロウサギの繁殖が順調に行われており、ホモウサギの準備ができ次第、脂質代謝の解析や動脈硬化の研究を開始する。また、アポCIII欠損ウサギの研究の一環として、ヒトアポCIII過剰発現トランスジェニックウサギの作製も並行して行っている。
4．アポAIIノックインウサギの作製に成功している。ヘテロ並びにホモウサギを解析したところ、血漿トリグリセリド値が正常ウサギより著しく減少していることが認められた。今後、これらのウサギを更に繁殖させ、アポAIIの導入により血漿トリグリセリドの低下機序を明らかにしたい。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当初の計画通り、研究はスムーズに行われている。動物施設のスペースや感染対策などの制約によりウサギの繁殖が遅れているが、おおむね順調に進展している。

今後の研究の推進方策

ウサギの研究を確実に推進するためには、やはりスペースの問題がネックとなっている。その問題を解決するために、本学の動物実験施設の担当者と相談したうえで、対応策を探ることにしている。また、ウサギの実験に関わるマンパワーの不足は短期間で解決することができず、積極的に留学生を受け入れることを考えている。

研究成果

• [国際共同研究] ミシガン大学/心臓血管研究所(米国)
  • 国名: 米国
  • 外国機関名: ミシガン大学/心臓血管研究所
• [国際共同研究] 西安交通大学/動脈硬化研究所(中国)
  • 国名: 中国
  • 外国機関名: 西安交通大学/動脈硬化研究所
• [雑誌論文] Deficiency of Cholesteryl Ester Transfer Protein Protects Against Atherosclerosis in Rabbits. (2017)
  • 著者名/発表者名: Zhang, J. Niimi, M. Yang, D. Liang, J. Xu, J. Kimura, T. Mattew, A. V. Guo, Y. Fan, Y. Zhu, T. Song, J. Ackermann, R. Koike, Y. Schwendeman, A. Lai, L. Pennathur, S. Garcia-Barrio, M. Fan, J. Chen, Y. E.
  • 雑誌名: Arterioscler Thromb Vasc Biol 巻: in press ページ: in press
  • DOI: 10.1161/ATVBAHA.117.309114
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Ampk suppresses connexin43 expression in the bladder and ameliorates voiding dysfunction in cyclophosphamide-induced mouse cystitis. (2016)
  • 著者名/発表者名: Zhang X, Yao J, Gao K, Chi Y, Mitsui T, Ihara T, Sawada N, Kamiyama M, Fan J, Takeda M.
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 6 ページ: 19708
  • DOI: 10.1038/srep19708
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Protein inhibitor of activated stat3 suppresses oxidized ldl-induced cell responses during atherosclerosis in apolipoprotein e-deficient mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Wang R, Zhang Y, Xu L, Lin Y, Yang X, Bai L, Chen Y, Zhao S, Fan J, Cheng X, Liu E.
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 6 ページ: 36790
  • DOI: 10.1038/srep36790
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Combined b, t and nk cell deficiency accelerates atherosclerosis in balb/c mice. (2016)
  • 著者名/発表者名: Cheng F, Twardowski L, Reifenberg K, Winter K, Canisius A, Pross E, Fan J, Schmitt E, Shultz LD, Lackner KJ, Torzewski M.
  • 雑誌名: PloS One 巻: 11 ページ: e0157311
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0157311
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Dietary cocoa powder improves hyperlipidemia and reduces atherosclerosis in apoe deficient mice through the inhibition of hepatic endoplasmic reticulum stress. (2016)
  • 著者名/発表者名: Guan H, Lin Y, Bai L, An Y, Shang J, Wang Z, Zhao S, Fan J, Liu E.
  • 雑誌名: Mediators of inflammation 巻: 2016 ページ: 1937572
  • DOI: 10.1155/2016/1937572
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著 / 謝辞記載あり
• [雑誌論文] Plasma High-Mannose and Complex/Hybrid N-Glycans Are Associated with Hypercholesterolemia in Humans and Rabbits. (2016)
  • 著者名/発表者名: Bai L, Li Q, Li L, Lin Y, Zhao S, Wang W, Wang R, Li Y, Yuan J, Wang C, Wang Z, Fan J, Liu E.
  • 雑誌名: PloS One 巻: 11 ページ: e0146982
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0146982
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] The whole-genome and transcriptome sequencing analysis of NZW and JW rabbits and WHHL rabbits. (2016)
  • 著者名/発表者名: Wang Z, Zhang J, Li H, Shiomi M, Liu E, Chen YE, Li Y, Fan J.
  • 学会等名: 第3回日中合同ウサギバイオサイエンスフォーラム
  • 発表場所: 佐賀大学鍋島キャンパス（佐賀県佐賀市）
  • 年月日: 2016-08-06
• [学会発表] Angiotensin II destabilizes coronary plaques in WHHL rabbits. (2016)
  • 著者名/発表者名: Li S, Wang Y, Miimi M, Ning B, Chen Y, Kang D, Wang Z, Yu Q, Waqar AB, Liu E, Zhang J, Shiomi M, Chen YE, Fan J.
  • 学会等名: 第48回日本動脈硬化学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京王プラザホテル（東京都新宿区）
  • 年月日: 2016-07-14 – 2016-07-15
• [学会発表] Hepatic overexpression of endothelial lipase reduces plasma HDL levels in transgenic rabbits. (2016)
  • 著者名/発表者名: Wang C, Nishijima K, Kitajima S, Niimi M, Ning B, Fan J.
  • 学会等名: 第48回日本動脈硬化学会総会・学術集会
  • 発表場所: 京王プラザホテル（東京都新宿区）
  • 年月日: 2016-07-14 – 2016-07-15
• [備考] 山梨大学大学院総合研究部医学域基礎医学系分子病理学講座
  • URL: http://www.med.yamanashi.ac.jp/clinical_basic/pathol01/