研究課題
疾患モデルを用いて評価する実験に使用するTg-Beclin1(Tet-on)マウスの導入が遅れたために繰越（翌債）を必要としたが、研究計画の遅れを取り戻すことができた。デスミン心筋症マウスモデルである心筋特異的点変異(R120G)α-βクリスタリン過剰発現マウス(Tg-CryAB-R120G)とTg-Beclin1(Tet-on)マウスを交配させて、テトラサイクリン投与によりBeclin1の活性を上昇させることでオートファジーが賦活化され、心筋内のアグリソームが除去されて心機能が改善するかどうかについて検討した。具体的には、テトラサイクリン投与6週間後に心機能や血行動態を評価して屠殺し、心筋の病理学的変化につき評価した。血中バイオマーカーも評価を行った。Beclin1を賦活化することでオートファジーを活性化することが不全心筋における蛋白品質管理を改善して心機能の改善につながるのではないかと想定し、そのような低分子化合物の取得を目指してBcl-xLのHis117周囲の構造に類似した化合物を化合物ライブラリーから探索した。具体的には、Beclin1のBH3ドメインに結合しうるBcl-xLのHis117周囲の構造に類似した化合物を予測して収集したフォーカスライブラリーからin silicoスクリーニングを経てin vitroにおけるBeclin1のBH3ドメインに対する結合性について表面プラズモン共鳴法および3Hにより標識した低分子化合物を用いた結合アッセイにより検討し、候補となる分子を複数見出した。
2: おおむね順調に進展している
平成28年度は平成27年度の遅れを取り戻して本研究応募時の申請書に記載した研究計画通り、順調に計画が進行している。
今後も本研究応募時の申請書に記載した研究計画に沿った研究を継続していく方針である。
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すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 6件、 謝辞記載あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 2件、 招待講演 2件)
Hypertens Res
巻: 40 ページ: 110-116
10.1038/hr.2016.117
Sci Rep.
巻: 7 ページ: 43920
10.1038/srep43920
J Mol Cell Cardiol
巻: 99 ページ: 123-137
10.1016/j.yjmcc.2016.03.017.
巻: 39 ページ: 764-768
10.1038/hr.2016.65.
巻: 95 ページ: 19-25
10.1016/j.yjmcc.2015.10.032
Heart Vessels.
巻: 31 ページ: 1016-9
10.1007/s00380-015-0661-5
