アディポネクチンの新たな作用発現・濃度調節機構とFavine作用機序の解明

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15H04853
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 下村 伊一郎 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (60346145)
• 研究分担者: 福原 淳範 大阪大学, 医学系研究科, 寄附講座准教授 (00437328) ; 前田 法一 大阪大学, 医学系研究科, 寄附講座准教授 (30506308)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: アディポネクチン / T-カドヘリン / PGI-PLD / Favine / 動脈硬化 / 脂肪肝

研究実績の概要

（１）　アディポネクチン/T-カドヘリン ポジティブループによるアディポネクチン組織集積と臓器保護機構の解明
ApoE-KOマウスとT-cadherin欠損（Tcad-KO）マウスとの交配により、Tcad&ApoE-ダブルKO（Tcad&ApoE-DKO）マウスを作製した。Tcad&ApoE-DKOマウスは、ApoE-KOマウスに比して有意に動脈硬化が進展していた。頸動脈結紮モデルでも、Tcad&ApoE-DKOマウスは、ApoE-KOマウスに比して内膜・中膜比が有意に増加していた。またT-cadherinの細胞外ドメインをそれぞれ欠失させた変異を作製し、BIACOREを用いた検討結果、細胞外ドメイン１及び２がアディポネクチンとの結合に必須のドメインであることを示した。
（２）　血中アディポネクチン濃度を規定するGPI-PLDの発見と制御機構、病態学的意義の解明
GPI-PLD欠損マウスを樹立し高脂肪高ショ糖食負荷を実施、主に耐糖能や脂肪肝に関して検討を進めている。ヒト血中GPI-PLDを測定、臨床パラメーターやアディポネクチン濃度との相関関係を調べている。
（３）　脂肪血管由来分泌因子Favineの脂肪細胞分化/脂質合成促進作用の発見とその機序の解明
Favineのシグナルを解析するために、血管内皮細胞のcell lineを用いてFavineの発現量を測定した。HUVEC,　F2, HMEC細胞を比較したが、HUVEＣ細胞の発現量が高く、実験に適していた。Favine蛋白をHEK293細胞で高発現させた培養上清を作成し、血管内皮細胞であるHUVECに添加し、炎症反応を解析した。HUVECにおいて、炎症性サイトカインで誘導されるVCAM1の発現が、Favineによって抑制されることを見出した。HUVEC細胞を用いたFavineのsiRNAの実験系を作成した。

現在までの達成度 (段落)

29年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

29年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [国際共同研究] SBP Medical Discovery Institute(米国)
  • 国名: 米国
  • 外国機関名: SBP Medical Discovery Institute
• [雑誌論文] Adiponectin association with T-cadherin protects against neointima proliferation and atherosclerosis. (2017)
  • 著者名/発表者名: Fujishima Y, Maeda N, Matsuda K, Masuda S, Mori T, Fukuda S, Sekimoto R, Yamaoka M, Obata Y, Kita S, Nishizawa H, Funahashi T, Ranscht B, Shimomura I.
  • 雑誌名: FASEB J 巻: 31 ページ: 1571-1583
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] The unique prodomain of T-cadherin plays a key role in adiponectin binding with the essential extracellular cadherin repeats 1 and 2 (2017)
  • 著者名/発表者名: Fukuda S, Kita S, Obata Y, Fujishima Y, Nagao H, Masuda S, Tanaka Y, Nishizawa H, Funahashi T, Takagi J, Maeda N, Shimomura I
  • 雑誌名: J Biol Chem 巻: 292 ページ: 7840-7849
  • 査読あり
• [学会発表] アディポネクチンはT-カドヘリンを介してエクソソーム合成を促進し、血中エクソソーム量を正に制御する (2017)
  • 著者名/発表者名: 小幡佳也、喜多俊文、藤島裕也、福田士郎、長尾博文、増田重樹、田中紀實、西澤 均、前田法一、下村伊一郎
  • 学会等名: 第90回日本内分泌学会学術総会
• [学会発表] GPIアンカー切断酵素GPI-PLDの機能解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 増田重樹、藤島裕也、福田士郎、田中紀實、小幡佳也、長尾博文、山岡正弥、喜多俊文、西澤 均、前田法一、船橋 徹、下村 伊一郎
  • 学会等名: 第90回日本内分泌学会学術総会
• [学会発表] アディポネクチンがT-カドヘリンに結合する部位と、その増加作用に関する考察 (2017)
  • 著者名/発表者名: 福田士郎、喜多俊文、増田重樹、小幡佳也、田中紀實、長尾博文、藤島裕也、西澤 均、船橋 徹、前田法一、下村伊一郎
  • 学会等名: 第60回日本糖尿病学会年次学術集会
• [学会発表] GPIアンカー切断酵素GPI-PLDが、糖・脂質代謝に与える影響 (2017)
  • 著者名/発表者名: 藤島裕也、増田重樹、喜多俊文、西澤 均、前田法一、下村 伊一郎
  • 学会等名: 第60回日本糖尿病学会年次学術集会
• [学会発表] 脂肪組織・血管由来分泌因子Favineの機能解析 (2017)
  • 著者名/発表者名: 小林祥子、福原淳範、大月道夫、森井英一、下村伊一郎
  • 学会等名: 第38回日本肥満学会