| 研究実績の概要 |
研究代表者はこれまでに、大腸菌由来の再構成型無細胞翻訳系（PUREシステム）を人工改変することによって、Nアルキルペプチド骨格および環状骨格の翻訳ペプチドへの導入に成功してきた（Kawakami et al., Chem. Sci., 5, 887-893, (2014)、Kawakami et al., J. Am. Chem. Soc., 135, 12297-12304, (2013)等）。また、分子進化工学的手法の一つであるin vitro virus法（mRNAディスプレイ法）と組み合わせることにより、抗体に匹敵する結合力および特異性（アイソフォーム選択的レベル）で標的ヒトタンパク質（VEGFR2など）に結合する新規人工環状Nアルキルペプチドリガンドを創製することに成功してきた。
昨年度までは、PUREシステムとmRNAディスプレイ法を組み合わせた抗体様の環状Nアルキルペプチドリガンドの創製技術に、ヒトタンパク質の無細胞質発現システムHUPEXを更に組み入れることにより、標的ヒトタンパク質に特異的に結合する抗体様環状Nアルキルペプチドリガンドを創製する新技術を開発し、更なるハイスループット化に成功してきた。本年度は、PUREシステム／mRNAディスプレイ法／HUPEXを用いた完全無細胞系スクリーニングシステムに、最適化した汎用ヒト腕型ロボット技術を取り入れることにより更なるハイスループット化を実現し、複数の抗体様環状Nアルキルペプチドリガンド群を創製することに成功した。更に、創製した抗体様環状Nアルキルペプチドリガンド群を用いたプロテオミクスへの応用も併せて実行した。
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