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2018 年度 実績報告書

シアリダーゼの局所イメージング新技術を利用したインフルエンザNA研究の新展開

研究課題

研究課題/領域番号 15H05644
研究機関静岡県立大学

研究代表者

高橋 忠伸  静岡県立大学, 薬学部, 准教授 (20405145)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2019-03-31
キーワードシアリダーゼ / インフルエンザウイルス / ノイラミニダーゼ / イメージング / 蛍光 / NA阻害薬 / 薬剤耐性 / 高感度
研究実績の概要

A型およびB型インフルエンザウイルスの表面などに見られる酵素ノイラミニダーゼ(NA)のシアリダーゼ活性を蛍光イメージングする新技術の応用法の開発と高性能化を行うことで、ウイルスおよびNAの研究を新展開させるツールの開発をめざす。疎水性の蛍光物質ベンゾチアゾリルフェノール誘導体(BTP3)にシアル酸(N-アセチルノイラミン酸、Neu5Ac)を結合させて蛍光性をオフ制御したシアリダーゼ蛍光イメージング剤BTP3-Neu5Acはシアリダーゼ活性の存在位置を蛍光染色できる。さらに、BTP3-Neu5Acと抗インフルエンザ薬(NA阻害薬)を併用することで、NAの薬剤耐性を検出することができる。この原理とタンパク質濃縮フィルターを利用して、簡単な操作で短時間に薬剤耐性を検出する方法を開発した。その感度は市販のインフルエンザ診断薬の検出感度と同等以上であった。また、インフルエンザウイルスのNAのシアリダーゼ活性が、一般的な酵素で最適とされる37℃よりも高い温度に適していることが分かった。多検体の薬剤耐性を短時間に高感度で調査できることで、薬剤耐性インフルエンザウイルスの監視や疫学情報の取得に貢献するものと期待される。本研究成果はオープンジャーナル誌に報告した。
BTP3-Neu5AcをウイルスのNA機能解析に応用するには、性能的にやや不十分なところがあった。そこで、インフルエンザウイルス感染細胞(内)のシアリダーゼ活性を高精度に蛍光イメージングするためのイメージング剤の高性能化を行った。シアリダーゼ活性の存在位置を高精度に蛍光染色する、あるいは蛍光化の感度を向上させるための構造改良基盤を確立した。高性能化したイメージング剤は、NAのシアリダーゼ活性の挙動解析などの基礎研究に貢献するものと期待される。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

備考

代表者の受賞:静岡県立大学(第5回)学長表彰、2018年12月17日
特許登録:鈴木 隆、高橋忠伸、南 彰、池田 潔、大坪忠宗、新規化合物及び該化合物を含む蛍光組成物特開、静岡県公立大学法人、学校法人常翔学園、2016-141652(2015年2月2日出願、2019年3月15日特許登録番号6493964)

  • 研究成果

    (45件)

すべて 2019 2018 その他

すべて 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 4件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (37件) (うち国際学会 2件、 招待講演 5件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] A I131V substitution in the fusion glycoprotein of human parainfluenza virus type 1 enhances syncytium formation and virus growth2019

    • 著者名/発表者名
      Keijo Fukushima*, Tadanobu Takahashi* (*They contributed equally as first authors), Masahiro Takaguchi, Seigo Ito, Chihiro Suzuki, Takashi Agarikuchi, Yuuki Kurebayashi, Akira Minami, Takashi Suzuki
    • 雑誌名

      Biol. Pharm. Bull

      巻: 42 ページ: in press

    • DOI

      10.1248/bpb.b18-00714

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] An easy, rapid, and sensitive method for detection of drug-resistant influenza virus by using a sialidase fluorescent imaging probe, BTP3-Neu5Ac2018

    • 著者名/発表者名
      Daisuke Kato*, Yuuki Kurebayashi*, Tadanobu Takahashi* (*These authors contributed equally to this work), Tadamune Otsubo, Hitomi Otake, Mika Yamazaki, Chihiro Tamoto, Akira Minami, Kiyoshi Ikeda, Takashi Suzuki
    • 雑誌名

      PLoS One

      巻: 13(7), ページ: e0200761

    • DOI

      doi.org/10.1371/journal.pone.0200761

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Down-regulation of glutamate release from hippocampal neurons by sialidase.Rapid regulation of sialidase activity in response to neural activity and sialic acid removal during memory processing in rat hippocampus2018

    • 著者名/発表者名
      Akira Minami, Ami Ishii, Sumika Shimba, Takahiro Kano, Eri Fujioka, Saki Sai, Nagisa Oshio, Sayaka Ishibashi, Tadanobu Takahashi, Yuuki Kurebayashi, Hiroaki Kanazawa, Nobuhiro Yuki, Tadamune Otsubo, Kiyoshi Ikeda, Takashi Suzuki
    • 雑誌名

      J. Biochem.

      巻: 163 ページ: 273-280

    • DOI

      doi.org/10.1093/jb/mvy003

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 薬剤耐性インフルエンザの蛍光検出単離2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸、紅林佑希、大坪忠宗、池田 潔、南 彰、鈴木 隆
    • 雑誌名

      BIO Clinica

      巻: 33 (3) ページ: 38-44

  • [雑誌論文] 薬剤耐性インフルエンザの単離法と簡易高感度検出法2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸、紅林佑希、加藤大介、大坪忠宗、池田 潔、南 彰、鈴木 隆
    • 雑誌名

      BIO Clinica

      巻: 33 (9) ページ: 98-103

  • [雑誌論文] 薬剤耐性インフルエンザの蛍光イメージング法の開発2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸、紅林佑希、加藤大介、大坪忠宗、池田 潔、南 彰、鈴木 隆
    • 雑誌名

      アグリバイオ

      巻: 2 (13) ページ: 81-87

  • [雑誌論文] 固体発光性色素を用いたシアリダーゼライブイメージングプローブの開発2018

    • 著者名/発表者名
      大坪忠宗、池田 潔、紅林佑希、南 彰、高橋忠伸、鈴木 隆
    • 雑誌名

      有機合成化学協会誌

      巻: 76 (12) ページ: 1272-1280

    • DOI

      doi.org/10.5059/yukigoseikyokaishi.76.1272

    • 査読あり
  • [学会発表] ヒト感染鳥インフルエンザウイルスの酵素性状の解析2019

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸
    • 学会等名
      公益財団法人ロッテ財団 第4回「若手研究者の集い」
    • 招待講演
  • [学会発表] インフルエンザB型ウイルスにおけるスルファチドの機能解析2019

    • 著者名/発表者名
      榊原佳子、紅林佑希、高橋忠伸、鈴木 隆
    • 学会等名
      日本薬学会 第139年会
  • [学会発表] インフルエンザA型ウイルスとスルファチドの結合分子機構の解析2019

    • 著者名/発表者名
      内野峻介、紅林佑希、高橋忠伸、林 野乃香、大石健太、常盤広明、鈴木 隆
    • 学会等名
      日本薬学会 第139年会
  • [学会発表] シアリダーゼを可視化する新規蛍光イメージング剤の開発2019

    • 著者名/発表者名
      田邊桃子、紅林佑希、高橋忠伸、大坪忠宗、三浦知美、藤田優香、南 彰、池田 潔、鈴木 隆
    • 学会等名
      日本薬学会 第139年会
  • [学会発表] ヒトパラインフルエンザウイルス検出のための新規蛍光イメージング剤の開発研究(4)2019

    • 著者名/発表者名
      高橋 由、土井彩加、福間彩加、三浦知美、紅林佑希、高橋忠伸、南 彰、寺岡文照、大坪忠宗、鈴木 隆、池田 潔
    • 学会等名
      日本薬学会 第139年会
  • [学会発表] ウイルス感染イメージング剤の高性能化とイメージングを利用した薬剤耐性変異の高効率解析2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸
    • 学会等名
      公益財団法人双葉電子記念財団 第24回成果発表会
    • 招待講演
  • [学会発表] おたふく風邪予防をめざした食品成分の探索2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸
    • 学会等名
      花王健康科学研究会 第15回成果報告会
    • 招待講演
  • [学会発表] インフルエンザウイルスシアリダーゼの高性能イメージング剤の開発2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸
    • 学会等名
      平成30年度中部乳酸菌研究会
    • 招待講演
  • [学会発表] ウイルス感染の蛍光イメージング剤の開発と応用2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸
    • 学会等名
      静岡大学超領域研究推進本部 第12回超領域研究会
    • 招待講演
  • [学会発表] ヒトに感染した鳥インフルエンザウイルス酵素のpH依存的性状の解析2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸、紅林佑希、河岡義裕、鈴木 隆
    • 学会等名
      USフォーラム2018
  • [学会発表] 小児呼吸器病原ウイルス感染における糖鎖受容体の機能グライコミクス2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸、紅林佑希、鈴木 隆
    • 学会等名
      USフォーラム2018
  • [学会発表] Low-pH stability pf neuraminidase isolated from H7N9 influenza virus2018

    • 著者名/発表者名
      Yuuki Kurebayashi, Chihiro Tamoto, Hiromu Tanaka, Tadanobu Takahashi, Yoshihiro Kawaoka, Takashi Suzuki
    • 学会等名
      Sialoglyco 2018
    • 国際学会
  • [学会発表] N-glycolylneuraminic acid on human epithelial cells prevents entry of influenza A viruses that possess N-glycolylneuraminic acid binding ability2018

    • 著者名/発表者名
      Tadanobu Takahashi, Maiko Takano, Yuuki Kurebayashi, Midori Masuda, Sawako Kawagishi, Masahiro Takaguchi, Takashi Yamanaka, Akira Minami, Tadamune Otsubo, Kiyoshi Ikeda, Takashi Suzuki
    • 学会等名
      Sialoglyco 2018
    • 国際学会
  • [学会発表] シアリダーゼ蛍光イメージング剤 BTP3-Neu5Ac を利用した高感度、簡易ウイルス検出系の確立2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸、紅林佑希、加藤大介、大坪忠宗、池田 潔、南 彰、鈴木 隆
    • 学会等名
      第32回インフルエンザ研究者交流の会シンポジウム
  • [学会発表] ノイラミニダーゼのシアル酸分子種に対する特異性の解析2018

    • 著者名/発表者名
      紅林佑希、高橋忠伸、山中隆史、池田潔、大坪忠宗、南 彰、鈴木 隆
    • 学会等名
      第32回インフルエンザ研究者交流の会シンポジウム
  • [学会発表] ヘマグルチニンにおけるスルファチド結合部位の解析2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸、林野乃香、紅林佑希、大石健太、益田 碧、川岸佐和子、藤田 侑、常盤広明、鈴木 隆
    • 学会等名
      第32回インフルエンザ研究者交流の会シンポジウム
  • [学会発表] 新型インフルエンザウイルスのNAの酸性安定性の年次変化2018

    • 著者名/発表者名
      大谷渚紗、紅林佑希、高橋忠伸、進藤大地、鈴木 隆
    • 学会等名
      第64回日本薬学会東海支部総会・大会
  • [学会発表] インフルエンザウイルスNAの酸性安定性がウイルス感染性に与える影響2018

    • 著者名/発表者名
      進藤大地、紅林佑希、高橋忠伸、大谷渚紗、鈴木 隆
    • 学会等名
      第64回日本薬学会東海支部総会・大会
  • [学会発表] バキュロウイルス発現系によるノロウイルスタンパク質の作製と機能解析2018

    • 著者名/発表者名
      安部友涼、紅林佑希、高橋忠伸、鈴木 隆
    • 学会等名
      第64回日本薬学会東海支部総会・大会
  • [学会発表] ヒトパラインフルエンザウイルスが末端シアル酸結合様式を認識する機構の解析2018

    • 著者名/発表者名
      大嶽 瞳、紅林佑希、福島圭穣、高橋忠伸、南 彰、鈴木 隆
    • 学会等名
      第37回日本糖質学会年会
  • [学会発表] インフルエンザウイルス感染におけるsulfatideの機能解析とウイルス増殖阻害剤の探索2018

    • 著者名/発表者名
      高橋忠伸、紅林佑希、林野乃香、大石健太、進藤大地、内野峻介、藤田 侑、常盤広明、小郷尚久、浅井彰良、鈴木 隆
    • 学会等名
      第37回日本糖質学会年会
  • [学会発表] H7N9トリインフルエンザウイルスシアリダーゼの酸性安定性の解析2018

    • 著者名/発表者名
      紅林佑希、高橋忠伸、田本千尋、大嶽 瞳、河岡義裕、鈴木 隆
    • 学会等名
      第37回日本糖質学会年会
  • [学会発表] ヒトパラインフルエンザウイルスの糖鎖認識に関わる分子機構の解明2018

    • 著者名/発表者名
      大嶽 瞳、紅林佑希、福島圭穣、高橋忠伸、南 彰、鈴木 隆
    • 学会等名
      第17回次世代を担う若手ファーマ・バイオフォーラム
  • [学会発表] シアル酸蛍光プローブを用いた薬剤耐性インフルエンザウイルスの検出分離法2018

    • 著者名/発表者名
      榊原佳子、紅林佑希、高橋忠伸、大坪忠宗、池田 潔、南 彰、鈴木 隆
    • 学会等名
      糖鎖科学中部拠点 第15回「若手の力」フォーラム
  • [学会発表] インフルエンザウイルスNAの酸性安定性によるアポトーシス誘導能の解析2018

    • 著者名/発表者名
      大嶽 瞳、紅林佑希、高橋忠伸、鈴木 隆
    • 学会等名
      糖鎖科学中部拠点 第15回「若手の力」フォーラム
  • [学会発表] 新型インフルエンザウイルスNAの酸性安定性の解析2018

    • 著者名/発表者名
      大谷渚紗、紅林佑希、高橋忠伸、鈴木 隆
    • 学会等名
      糖鎖科学中部拠点 第15回「若手の力」フォーラム
  • [学会発表] シアリダーゼの細胞内局在を可視化する高精度イメージング剤の開発2018

    • 著者名/発表者名
      三浦知美、紅林佑希、高橋忠伸、大坪忠宗、池田 潔、南 彰、鈴木 隆
    • 学会等名
      糖鎖科学中部拠点 第15回「若手の力」フォーラム
  • [学会発表] インフルエンザHAのスルファチド結合機構の解析2018

    • 著者名/発表者名
      紅林佑希、高橋忠伸、林野乃香、大石健太、藤田 侑、常盤広明、鈴木 隆
    • 学会等名
      糖鎖科学中部拠点 第15回「若手の力」フォーラム
  • [学会発表] Change of low-pH stability in influenza A(H1N1)pdm09 NA after pandemic2018

    • 著者名/発表者名
      Nagisa Otani, Yuuki Kurebayashi, Tadanobu Takahashi, Takashi Suzuki
    • 学会等名
      第66回日本ウイルス学会学術集会
  • [学会発表] Role of sulfatide in influenza B virus infection2018

    • 著者名/発表者名
      Keiko Sakakibara, Yuuki Kurebayashi, Tadanobu Takahashi, Takashi Suzuki
    • 学会等名
      第66回日本ウイルス学会学術集会
  • [学会発表] Functional analysis of low-pH stable NA in influenza virus replication and establishment of its mass expression system2018

    • 著者名/発表者名
      Hitomi Otake, Yuuki Kurebayashi, Tadanobu Takahashi, Takashi Suzuki
    • 学会等名
      第66回日本ウイルス学会学術集会
  • [学会発表] Recognition of terminal sialic acid linkage of human parainfluenza virus2018

    • 著者名/発表者名
      Yuuki Kurebayashi, Hitomi Otake, Tadanobu Takahashi, Takashi Suzuki
    • 学会等名
      第66回日本ウイルス学会学術集会
  • [学会発表] インフルエンザA型ウイルスのスルファチド結合における分子機構の解析2018

    • 著者名/発表者名
      内野峻介、紅林佑希、高橋忠伸、林野乃香、大石健太、常盤広明、鈴木 隆
    • 学会等名
      日本病院薬剤師会東海ブロック・日本薬学会東海支部合同学術大会2018
  • [学会発表] インフルエンザA型ウイルスのスルファチド結合における分子機構の解析2018

    • 著者名/発表者名
      榊原佳子、紅林佑希、高橋忠伸、高橋俊策、鈴木 隆
    • 学会等名
      日本病院薬剤師会東海ブロック・日本薬学会東海支部合同学術大会2018
  • [学会発表] シアリダーゼの細胞内分布を可視化する新規蛍光イメージング剤の開発2018

    • 著者名/発表者名
      三浦知美、紅林佑希、高橋忠伸、大坪忠宗、池田 潔、南 彰、鈴木 隆
    • 学会等名
      日本病院薬剤師会東海ブロック・日本薬学会東海支部合同学術大会2018
  • [学会発表] 酸性安定性を有するインフルエンザウイルスによるアポトーシス誘導能の解析2018

    • 著者名/発表者名
      大嶽 瞳、紅林佑希、高橋忠伸、鈴木 隆
    • 学会等名
      日本病院薬剤師会東海ブロック・日本薬学会東海支部合同学術大会2018
  • [学会発表] High-Efficiency Detection of Drug Resistant-Influenza Virus by Imaging of Sialidase Activity2018

    • 著者名/発表者名
      Keiko Sakakibara, Yuuki Kurebayashi, Tadanobu Takahashi, Tadamune Otsubo, Kiyoshi Ikeda, Minami Akira, Takashi Suzuki
    • 学会等名
      第23回静岡健康・長寿学術フォーラム
  • [備考] 静岡県立大学 薬学部 生化学分野 HP

    • URL

      https://w3pharm.u-shizuoka-ken.ac.jp/~biochem/index.html

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公開日: 2019-12-27  

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