研究課題
尿路上皮特異的にBmal1、Cx43をノックダウンしたマウスを作製した。validationとしてqPCR、immunoblotting、免疫染色を行い、尿路上皮特異的にBmal1,Cx43が有意にノックダウンされている事を確認した。これらのマウスに対して、aVSOPによる排尿行動解析、水圧拡張時の尿中ATP測定による膀胱機能解析を進めており、DNAマイクロアレイでこれらのマウスの遺伝子変異を網羅的に解析することを予定している。また、尿路上皮末梢時計の調律因子の探索のため当初はPer2::Lucマウスを用いたレポーターアッセイでのスクリーニングを考えていたが、マウス尿路上皮の安定した培養は困難であったため、per1-Lucラットにて代用することとした。per1-Lucラットはナショナルバイオリソースプロジェクト(NBRP)から購入した。Per2::Lucマウス同様、per1-Lucラットの尿路上皮を体外培養すると概日発光リズムがあることを確認した。現在、発光リズムに影響を与える薬剤探索実験を進めている。候補薬剤に関しては、ヒト不死化尿路上皮細胞にBmal1::dLucを遺伝子導入させたin vitroのレポーターアッセイで既に同定している。
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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