研究課題
本研究課題では、設計したケミカルデバイスを利用してsiRNA-パターン認識受容体 (PRR) 間の相互作用を理解し、得られた情報を基にsiRNA医薬開発において予期せぬ副作用発現の原因となる自然免疫応答を回避可能なステルス型siRNA医薬設計法の開発を目的とする。平成29年度は、プロトタイプ型ケミカルデバイス (7Br-deAおよび3-Br-deA) 導入siRNAを利用した自然免疫応答の発現解析と、新たに設計した標的補足型ケミカルデバイス (3dia-deAおよび7-dia-deA) の合成研究に取り組んだ。まず、二本鎖RNAを認識するPRRであるToll-like receptor 3 (TLR3) を強制発現させたHEK293細胞を用いてレポータージーンアッセイにより自然免疫応答の発現解析を行ったところ、siRNAセンス鎖5’末端付近に3-Br-deAを導入したsiRNA群において自然免疫応答が低減する傾向が観察された。すなわち、TLR3によるsiRNAの分子認識においては、siRNAセンス鎖5’末端部マイナーグルーブ側での相互作用が重要な役割を果たしていることが示唆された。一方、複数のPRRsを介した自然免疫応答を一括して評価可能なWhole Blood Assayを行った場合、TLR3の場合とは異なり、siRNAセンス鎖5’末端部に3-Br-deAを導入したsiRNA群において、自然免疫応答の増強が観察された。続いて、この違いがいずれのPPRとの相互作用によりもたらされたかを明らかとするため、標的タンパク質を補足可能なケミカルプローブ (3dia-deAおよび7-dia-deA) の合成に着手した。7-deazaadenosine誘導体とのクロスカップリング反応により、7-dia-deAの合成を達成しており、これを用いた標的PRRの補足実験を進行中である。
28年度が最終年度であるため、記入しない。
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