|
①嗅覚刺激により活性化される視床下部ニューロンの可視化・同定
視床下部の嗅覚刺激に対する応答を調べるために、視床下部におけるカルシウムイメージングを行った。本年度は、前年度に確立した、視床下部でカルシウムインジケーターを発現する５系統のトランスジェニックフィッシュについてカルシウムイメージングを試みた。しかし、いずれの系統においても、嗅覚刺激に対する視床下部の応答を確認できなかった。そのため視床下部でカルシウムイメージングが可能な新たな系統の探索を行い、現在複数系統を準備中である。並行して、嗅覚刺激により活性化される視床下部ニューロンのマーカー遺伝子の同定を行った。神経活動マーカーであるc-fosと神経ペプチド遺伝子の蛍光二重in situ hybridizationを行い、食物に含まれる嗅覚物質に応答するニューロンで発現する神経ペプチド遺伝子を同定した。性フェロモンに応答するニューロンで発現する神経ペプチドの同定も進めたが、こちらは未だ同定に至っていないため、今後候補となる神経ペプチド遺伝子の数を増やしてさらに解析する必要がある。
②嗅覚刺激により活性化される視床下部ニューロンの機能の解明
刺激により活性化される視床下部ニューロンの機能を解明するために、嗅覚刺激により起こる生体内の変化をモニターする方法の確立に取り組んだ。本年度は、性フェロモン刺激により生体内で起こる変化をモニターするためのトランスジェニックフィッシュの作出を行った。トランスジェニックフィッシュが確立すれば効率的に性フェロモン刺激に対する応答をリアルタイムにモニターできることが期待される。並行して、性フェロモンの受容体のノックアウトフィッシュの作出も行った。今後このノックアウトフィッシュの表現型を解析し、性フェロモン刺激が生体内にどのような変化を起こすのかを解析する予定である。
|
