| 研究課題/領域番号 |
15J03325
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
新上 雄司 東北大学, 薬学研究科, 特別研究員(DC1)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-24 – 2018-03-31
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| キーワード | 脂質生物学 / GPCR / LysoPS / 免疫学 |
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| 研究実績の概要 |
当研究室では、リゾホスファチジルセリン（LysoPS）に特異的に反応するGα12/13共役型受容体として、LPS2/P2Y10、LPS2L/A630033H20Rik、LPS3/GPR174（LPS3はGαsとGα13に共役）を同定した。これら３つのLysoPS受容体はT細胞・B細胞に発現する等、発現パターンが酷似すること、さらに共通してGα13に共役することから、重複した機能を有すると想定している。実際に、各受容体の一重欠損マウスは顕著な異常を示さない。そこで本研究では、これら３つのLysoPS受容体の三重欠損（TKO）、または二重欠損（DKO）マウスを作製し、重複したGα12/13シグナルの機能を明らかにすることを目的とした。
まず、LysoPS受容体の多重欠損マウスを作製するために、一度に複数の遺伝子に変異を生じさせることが可能なCRISPR-Cas9システムを用いて作製を試みた。結果として、各受容体が細胞膜に発現せず、LysoPSに応答しない変異配列を持つLPS2/2L/3 TKOマウス、LPS2/2L DKOマウスを複数ライン樹立した。これらのマウスは通常飼育下では、顕著な異常を示さなかった。そこで、免疫応答時に異常が生じるか調べた。3つのLysoPS受容体は、B細胞で最も発現が高いため、抗原投与時の血中抗体価を野生型マウスと比較した。各マウスに抗原を投与すると、野生型マウスと比較し、LPS2/2L/3 TKOマウス、LPS2/2L DKOマウスで血中抗体価が有意に上昇することが明らかとなった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
現在までの進捗状況としては、「おおむね順調に進展している」。理由として、本研究において最も重要であるLysoPS受容体多重欠損マウスを、当初の研究計画通り、１年目で作製が達成されたことが挙げられる。さらに、個体数が少なく、初期解析の現状ではあるが、LysoPS受容体多重欠損マウスの異常を見出したことも理由に挙げられる。「当初の計画以上に進展している」を選択しなかった理由として、現在LysoPS受容体多重欠損マウスの繁殖を拡大している状況であり、十分な個体数で実験が行えなかったことが挙げられる。
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| 今後の研究の推進方策 |
現在LysoPS受容体多重欠損マウスの繁殖を拡大しており、今後は、個体数を増やして実験が可能となるため、様々な疾患モデルを試す予定である。また、今回、LysoPS受容体多重欠損マウスに抗原投与した際の血中抗体価を調べると、野生型マウスと比較し、有意に血中抗体価が上昇するという結果が得られた。そこで、この作用メカニズムを個体レベル・細胞レベルで解析する予定である。また、各受容体一重欠損マウスで抗原投与の血中抗体価が有意に上昇するか調べ、複数のLysoPS受容体の重複した機能か検証する予定である。
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