• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

2017 年度 実績報告書

金ナノ粒子をモデルとした、生体内でのアミロイド線維形成機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 15J03570
研究機関大阪大学

研究代表者

牟田 寛弥  大阪大学, 理学研究科, 特別研究員(DC1)

研究期間 (年度) 2015-04-24 – 2018-03-31
キーワード核磁気共鳴 / アミロイド
研究実績の概要

卵白リゾチーム(Hen Egg White Lysozyme)の線維形成を、酢酸緩衝液を終濃度25mM加えてpHを4.8付近に調製し、2,2,2-トリフルオロエタノールを終濃度50%(体積分率)加え、チオフラビンTを終濃度5μM加えた溶液条件で行った。金のナノ粒子は、終濃度で0から250nMの広い濃度範囲で加え、その効果を検証した。線維形成によるチオフラビンTの蛍光値の上昇を、超音波照射装置を組み込んだ蛍光高度計により観察した結果、すべての金ナノ粒子の濃度領域において、線維形成が促進されることを確認した。今回検証したリゾチームの線維形成に対する金のナノ粒子の効果を、ヘパリ
ンや塩化ナトリウム、硫酸ナトリウムなどの様々な添加物の効果とともに学術論文として纏め、学術雑誌に掲載済みである。
また、並行して進めていた、「様々なアミロイド性ペプチドが混在する複雑な系におけるアミロイド線維形成機構の解明」というテーマでも大きな進展があった。
こちらでは、透析アミロイドーシスに関連する蛋白質であるβ2-ミクログロブリン(β2m)と、そのアミロイド原生の高い配列をAchromobacterプロテアーゼI(API)により切り出した加水分解断片(K1,K2,K3,…,K9)について着目している。特に興味深いのは、加水分解断片の混合物中でのK3断片の凝集が、K3断片単独の凝集に比べて遅れる傾向にあること。そして、β2m全長とK3断片の両分子種が混在すると互いの線維形成能を弱め合う現象を確認した。これら現象を、副次的な蛋白質間相互作用が存在した場合の線維形成に対する影響の典型例であると考え、核磁気共鳴法(NMR)を用いて、K3断片とβ2m全長の結合様式を議論できる結果も得られた。こちらも学術論文として投稿する予定である。

現在までの達成度 (段落)

29年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

29年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2017

すべて 雑誌論文 (2件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Heparin-dependent aggregation of hen egg white lysozyme reveals two distinct mechanisms of amyloid fibrillation2017

    • 著者名/発表者名
      Nitani Ayame、Muta Hiroya、Adachi Masayuki、So Masatomo、Sasahara Kenji、Sakurai Kazumasa、Chatani Eri、Naoe Kazumitsu、Ogi Hirotsugu、Hall Damien、Goto Yuji
    • 雑誌名

      Journal of Biological Chemistry

      巻: 292 ページ: 21219~21230

    • DOI

      10.1074/jbc.M117.813097

  • [雑誌論文] Salt-induced formations of partially folded intermediates and amyloid fibrils suggests a common underlying mechanism2017

    • 著者名/発表者名
      Goto Yuji、Adachi Masayuki、Muta Hiroya、So Masatomo
    • 雑誌名

      Biophysical Reviews

      巻: 10 ページ: 493~502

    • DOI

      10.1007/s12551-017-0370-7

  • [学会発表] Amyloid Fibrillation in Promiscuous Systems Containing Various Amyloidgenic Peptides2017

    • 著者名/発表者名
      Hiroya Muta, Masatomo So, Kazumasa Sakurai, and Yuji Goto
    • 学会等名
      第17回蛋白質科学会年会 仙台国際センター 2017年6月20日―22日
  • [学会発表] Amyloid Fibrillation in Promiscuous Systems Containing Various Amyloidgenic Peptides2017

    • 著者名/発表者名
      Hiroya Muta, Masatomo So, Kazumasa Sakurai, and Yuji Goto
    • 学会等名
      第55回生物物理学会年会 つくば国際会議場 2017年9月19日―21日

URL: 

公開日: 2018-12-17  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi