| 研究課題/領域番号 |
15J11177
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
吉田 哲也 東京大学, 農学生命科学研究科, 特別研究員(DC1)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-24 – 2018-03-31
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| キーワード | 植物ウイルス / 抵抗性遺伝子 |
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| 研究実績の概要 |
今年度は、構築したウイルス・レクチン発現プラスミドを用いたレクチン抵抗性遺伝子の探索に着手した。植物細胞よりプロトプラストを調製した後、当該プラスミドを導入しウイルスおよびレクチンの効率的な発現条件の検討を行った。その結果、プロトプラスト内での安定したウイルス因子およびレクチン遺伝子の発現系を構築した。
また、並行してレクチン型抵抗性遺伝子による抵抗性の作用機構解明に向け、レクチン遺伝子と標的ウイルスの因子との間の相互作用の解析を行った。その過程で、所属研究室で単離されたレクチン型抵抗性遺伝子JAX1およびポテックスウイルスの一種であるpotato virus X（PVX）の複製酵素をNicotiana benthamianaの展開葉において一過的に発現させ免疫沈降法により解析した。その結果、野生型PVXの複製酵素とJAX1は相互作用したが、JAX1抵抗性を打破するPVX株の複製酵素とJAX1は相互作用しなかった。このことから、JAX1の標的がウイルスの複製酵素であり、抵抗性発現にはJAX1の複製酵素への結合が重要である可能性が考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ウイルスおよびレクチン因子のプロトプラストにおける発現系を構築し、特にレクチン遺伝子JAX1とポテックスウイルス複製酵素の相互作用を確認した。抵抗性機構の未知だったJAX1の機能解明に近づく成果が得られたため、順調に進展しているものと考えている。
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| 今後の研究の推進方策 |
当初は、昨年度構築したウイルス・レクチン発現用プラスミドを用いて新規なレクチン型抵抗性遺伝子の探索を進める予定であった。しかし、それと並行して進めていたレクチン遺伝子-ウイルス因子間相互作用解析の結果、作用機構が未知の既報のレクチン型抵抗性遺伝子JAX1の抵抗性発現能と複製酵素への結合能が相関することを示す実験結果が得られた。そこで今後は、JAX1の抵抗性機構の解明に焦点を絞り解析を進める予定である。
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