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2016 年度 実施状況報告書

除皮質灌流標本を用いた呼吸/循環と歩行の間の自律機能のメカニズムの解析

研究課題

研究課題/領域番号 15K01393
研究機関星薬科大学

研究代表者

矢澤 格  星薬科大学, 先端生命科学研究所, 特任研究員(講師相当) (40360656)

研究分担者 塩田 清二  星薬科大学, 先端生命科学研究所, 教授 (80102375)
研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワードLocomotion / Spinal Cord
研究実績の概要

本研究では除皮質灌流標本を用い、(1)Hyperoxia/normocapneaといった特異的呼吸状態により変調した交感神経トーヌスが脊髄下向路を介し頸髄と腰仙髄で構成される神経回路網(Forelimb Pattern Generator [FPG]やLocomotor Pattern Generator [LPG])を活性化することで上下肢に左右交互の歩行様活動を自発的に産生すること、(2)下肢の歩行時には活性化したLPGは脊髄上向路を介して脳幹内の呼吸中枢に影響を及ぼす(Spinal-Feedback Mechanismによって呼吸リズムが歩行のそれに同期する)こと、(3)上肢の歩行時には一過性の呼吸数と血圧の上昇が生じ、活性化している脊髄(FPG)から発生したインパルスが脊髄上向路を介し三叉神経系に影響を及ぼし口呼吸が産生されること、を生きた動物でも再現可能であるか、上記に関連した中枢領域のダイナミックマップの作成をメインテーマとしている。
昨年度は、歩行時の活性化したFPGとLPGが脊髄内で互いにどのような影響を及ぼし合うのか、両者のどちらが呼吸/循環中枢により影響を及ぼすのかを調べるために、全身灌流標本を胸椎レベルで離断する前後で細胞外記録を行った。しかし、活性化したFPGとLPG間や個々の脳幹に対する影響度について更なる精査の必要性があった。
今年度は、さらに例数を増やし上記を精査する。それに並行して、灌流標本に人工血液を導入し、自発的な交互運動を産生する至適条件を見出し、新灌流システムの作成を行うことを計画していた。しかし、今年度は昨年度の計画を一時延期し、歩行様活動時にLPGを構成する一部の神経回路網がどのようなダイナミックマップを形成しながら歩行様活動を出力するのかといった基礎研究を光学的・電気生理学的手法を用いて行った。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

4: 遅れている

理由

LPGの重要性を確認する基礎実験追加のため、除皮質灌流標本を用いた実験回数が減ったことが主な原因である。

今後の研究の推進方策

今後は、これまでの遅れを取り戻すべく、除皮質灌流標本に人工血液を導入した新灌流システムの作成を行い、自発的な交互運動を産生する至適条件を見出すこと。そして、新灌流システムの作成や光学計測法を除皮質灌流標本に適用し、光学計測法を灌流標本に適用し、自発歩行の誘発時の脳幹と脊髄との間で起こる神経伝達様式を示す機能的マップの作成を計画している。

次年度使用額が生じた理由

LPGの重要性を確認する基礎実験のため除皮質灌流標本を用いた実験回数が減ったことが挙げられる。

次年度使用額の使用計画

人工血液実験に必要なmembrane oxygenator、人工血液、光学計測用色素、灌流標本用のチャンバー等の購入を予定している。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2017

すべて 学会発表 (3件) (うち招待講演 1件)

  • [学会発表] シンポジウム「呼吸ニューロンネットワーク機構の多階層的理解:延髄スライスでの微小神経回路から覚醒動物まで」 “A decerebrates & artificially perfused in situ preparation for the study of respiratory neuron network”2017

    • 著者名/発表者名
      I. Yazawa
    • 学会等名
      第94回日本生理学会大会
    • 発表場所
      浜松
    • 年月日
      2017-03-28 – 2017-03-30
    • 招待講演
  • [学会発表] Detecting causal influences among the locomotion-like cellular Ca & output neural activities in the lumber spinal cord using state-space modeling2017

    • 著者名/発表者名
      S. Okazaki, H. Mikami, I. Yazawa, K. Takeda, H. Onimaru, Y. Okada
    • 学会等名
      第94回日本生理学会大会
    • 発表場所
      浜松
    • 年月日
      2017-03-28 – 2017-03-30
  • [学会発表] 第94回日本生理学会大会2017

    • 著者名/発表者名
      Y. Okada, I. Yazawa, K. Takeda, S. Okazaki, Y. Tamura, H. Onimaru
    • 学会等名
      Respiratory activities of medullary neurons and astrocytes in the isolated brainstem-spinal cord analyzed by Ca imaging
    • 発表場所
      浜松
    • 年月日
      2017-03-28 – 2017-03-30

URL: 

公開日: 2018-01-16  

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