| 研究実績の概要 |
ネッタイツメガエル皮膚から単離されたPxtペプチドの内、特に泡立ち活性の強いPxt-2, Pxt-5, Pxt-12とその逆配列のreverse Pxt-2, reverse Pxt-5, reverse Pxt-12について、性質解明を実施した。まず固相合成法を用い、6つの上記ペプチドを合成し、その純度についてHPLC及びMALDI-MSにより確認した。その後、物理化学的特性を円二色性分散計(CD)で調べたところ、50%TFE中でいずれも有意なアルファヘリックス構造形成を示した。6つのペプチドの内Pxt-5とreverse Pxt-5は、最も強い表面張力低下能を示した。さらにPxt-2, Pxt-5, reverse Pxt-5は、高濃度ではミセル形成を示し、限界ミセル濃度を求めることができた。生物化学的性質としては、Pxt-5は赤血球に対し、最も強い溶血活性を示した。また6つのペプチドの中でreverse Pxt-5は、培養皮膚細胞のHaCaT細胞に対し、炎症マーカー及びストレスマーカーであるIL-8とHMOX-1(heme oxygenase)の、最も強い発現誘導作用と細胞毒性作用を示した。一方Pxt-12とreverse Pxt-12はグラム陰性細菌及びグラム陽性細菌に対し弱い抗菌作用、赤血球に対して弱い溶血作用、HaCaT細胞に対して弱い細胞毒性作用を示した。すべての6つのペプチドは、10-5 Mの濃度で肥満細胞に対し、20%-50%のヒスタミンの遊離活性が認められた。またreal-time PCRを用いてPxt peptidesの各種臓器での発現を調べたところ、皮膚以外にもPxt-5は精巣に、Pxt-12は筋肉にも発現していた。
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