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2016 年度 実施状況報告書

白金性能を超える新規[NiFe]ヒドロゲナーゼの電子伝達機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 15K05566
研究機関九州大学

研究代表者

尹 基石  九州大学, カーボンニュートラル・エネルギー国際研究所, 准教授 (50701497)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワードヒドロゲナーゼ / 水素酸化活性 / 酸素安定性
研究実績の概要

ヒドロゲナーゼは、水素酸化及び水素発生反応を行うことができる金属酵素であり、その優れた機能を水素利用技術へと応用する研究が大変注目されている。しかし、ヒドロゲナーゼは酸素暴露後に失活するという問題点がある。我々は今まで、「酸素耐性」を示す新規ヒドロゲナーゼの探索と、その生化学的な特性とタンパク質結晶構造解析を行っている。実際、我々は、阿蘇くじゅう国立公園から通性嫌気性細菌Citrobacter sp. strain S-77株を単離した。本新規細菌S-77株から「高水素酸化活性と高酸素安定性」の両特性を併せ持つ新規「NiFe」ヒドロゲナーゼ([NiFe]S77)を細胞膜から精製し、その生化学的な特性解析を行った。また、その精製酵素を用いた固体高分子型水素燃料電池(PEFC)の創製を行い、水素酸化反応において本酵素が白金を遥かに超える優れた触媒性能を示すことを世界で初めて実証した)。現在、我々は本S-77株の全ゲノムの解析(約5.2 Mbp)に成功し、本細菌には二種類の異なった酸素安定性「NiFe」ヒドロゲナーゼの存在を確認している。ゲノム解析の結果によって、本新規[NiFe]S77には既存のヒドロゲナーゼとは異なる鉄硫黄クラスターの存在が予測されることから、タンパク質結晶化などによるその詳細な構造と機能の解析を行っている。これまでの研究結果から、「NiFe」ヒドロゲナーゼの酸素安定性には電子伝達機能を示す小サブユニットが重要な役割をしていると考えられる。現在、新規に得た酸素安定型「NiFe」ヒドロゲナの構造解析とその酸素耐性機構の解明を行っている。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

新規[NiFe]S77のタンパク質結晶化とその解析、また、酸素耐性機構の解明などおおむね順調に進展している。

今後の研究の推進方策

これまでの研究結果によると、新規酵素[NiFe]S77の4量体の複合体(HybC、HybO、HybB、HydA)の精製とその電子受容体と思われるHybBとHydAの単離精製は極めて困難である。そこで、[NiFe]S77の結晶構造解析とその生化学的な特性解析などによる新規[NiFe]S77ヒドロゲナの酸素耐性機構の解明に挑みたい。

次年度使用額が生じた理由

予定した旅費と人件費・謝金などを節約することができた。

次年度使用額の使用計画

直接研究経費(物品費、研究成果発表、論文投稿など)に活用し、最終年度の研究成果発表などを充実させるために使用したい。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2017 2016

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 謝辞記載あり 2件) 学会発表 (2件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] Acetyl-CoA Production by Encapsulated Pyruvate Ferredoxin Oxidoreductase in Alginate Hydrogels2017

    • 著者名/発表者名
      Takenaka, Makoto; Yoon, Ki-Seok; Matsumoto, Takahiro; Ogo, Seiji
    • 雑誌名

      Bioresour. Technol.

      巻: 227 ページ: 279-285

    • DOI

      10.1016/j.biortech.2016.12.051

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [雑誌論文] Structure and Reactivity of a Ru-based Peroxide Complex as a Reactive Intermediate of O2-Promoted Activation of a C–H Bond in a Cp* Ligand2017

    • 著者名/発表者名
      Yatabe, Takeshi; Kishima, Takahiro; Nagano, Hideaki; Matsumoto, Takahiro; Yamasaki, Mikio; Yoon, Ki-Seok; Ogo, Seiji
    • 雑誌名

      Chem. Lett.

      巻: 46 ページ: 74-76

    • DOI

      10.1246/cl.160909

    • 査読あり / 謝辞記載あり
  • [学会発表] Biochemical characterization of Acetaldehyde-alcohol dehydrogenase from Citrobacter sp. S-772016

    • 著者名/発表者名
      Kohsei Tsuji, Ki-Seok Yoon, Seiji Ogo
    • 学会等名
      6th CSJ Chemistry Festa
    • 発表場所
      Tokyo, Japan
    • 年月日
      2016-11-14 – 2016-11-16
  • [学会発表] iochemical and phylogenetic studies of Hyd-2 type O2-tolerant [NiFe]hydrogenase2016

    • 著者名/発表者名
      Ki-Seok Yoon
    • 学会等名
      Gordon Research Conference: Metallocofactors
    • 発表場所
      Stonehill College in Easton, MA, United States
    • 年月日
      2016-06-12 – 2016-06-17
    • 国際学会

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公開日: 2018-01-16  

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