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Inv遺伝子変異マウスは内臓の位置が完全に左右逆転する内臓逆位の表現型を表すとともに多発性嚢胞腎を発症する。またヒトの家族性若年性ネフロン癆はINV遺伝子の変異か原因であることが解っているがInv遺伝子の左右軸形成や腎臓ならびに他の生体組織における生理学的な機能は明らかにされていない。 本研究では組織特異的に特定のレスキュー遺伝子を欠失させる新たな手法(コンディショナルレスキュー法)を考案し、Inv遺伝子の生理学的な機能を解明するとともに、本法を用いた解析手法の確立を進めた。本法は従来のコンデショナルノックアウトマウス法と比べ、短時間かつ低コストで目的とする遺伝子の機能解析が可能となる。またその作製にはES細胞を必要としないことから、マウス以外の動物種の研究にも応用可能な新規の手法である。
本研究では先ずコンディショナルレスキューマウスの作製に必要とされるベクターを構築し、構築したベクターを用いてInv 遺伝子変異によって生じる内臓逆位等の表現型が完全にレスキューされた3系統のコンディショナルレスキューマウスを作製することに成功した。また得られたマウスより初代培養細胞を樹立し、Cre遺伝子の発現依存的にレスキュー遺伝子の欠失が誘導されることをin vitroにおいて確認した。さらに末梢神経組織特異的にCre遺伝子が活性化されるP0-Creマウスとの交配で得られたコンディショナルレスキューマウスの解析から、本研究の目的どおりに神経特異的にInvレスキュー遺伝子の欠失が誘導されていることを証明した。
本研究により組織または発生時期特異的に特定の遺伝子の欠失誘導を可能とするコンディショナルレスキュー法が有効に機能することが証明された。今後この手法はInv遺伝子に限らず、新規の遺伝子機能の解析手法として広く適用されることが期待される。
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