研究課題
平成２６～２８年度までの研究において、TMCO5Aが伸長精子細胞のManchette に局在すること、つまりTMCO5Aは Manchette微小管の結合蛋白質であることが免疫蛍光抗体法によって示唆された。しかし、TMCO5A をCOS7培養細胞に発現させたところ、細胞骨格である微小管と共存するのではなく、核膜・小胞体膜に局在することが判明し、TMCO5Aの局在や挙動の再検討を行った。共焦点レーザー顕微鏡の解析により、TMCO5Aは Manchette 微小管に近接して存在するものの、その局在は完全には一致せず、Manchette 微小管よりも核膜側に局在することが明らかとなった。平成２９年度において、Nesprin1とTMCO5A、PNA-lectinとTMCO5Aによる二重染色を行うとともに、免疫電顕による検討を行った結果、TMCOO5Aは微小管と核膜の間に局在することを確認した。平成３０年度において、核膜と微小管の結合を仲介する分子SUN4 に対する抗体を作成し、この抗体を用いてTMCO5A分子と核膜および Manchette 微小管の位置関係を詳細に分析した。その結果、TMCO5AはSUN4分子と局在を同じくすることが判明した。すなわち、TMCO5Aは常に伸長精子細胞のManchetteに沿って存在するが、Manchetteそのものではなく、Manchetteと核膜の境界部に局在することが明らかとなった。これらの結果から、TMCO5AはManchetteと恊働して、伸長精子細胞における核の伸長や鞭毛形成に関わる可能性が示唆された。
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