研究課題/領域番号 |
15K07558
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研究機関 | 福井県立大学 |
研究代表者 |
宮台 俊明 福井県立大学, 海洋生物資源学部, 教授 (20157663)
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研究分担者 |
末武 弘章 福井県立大学, 海洋生物資源学部, 准教授 (00334326)
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研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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キーワード | 口白症ウイルス / ゲノム / ワクチン |
研究実績の概要 |
(1)口白症ウイルスゲノムの解析:感染脳からRNAを抽出し、rRNAの除去剤とループPCR法を用いて、未知塩基配列のRNAからcDNAを調整し、次世代シーケンサーを用いて塩基配列を決定した。BLAST解析によってトラフグゲノム配列以外の配列を検索したところ、Porcine picobirna virusとDengue virusの類似配列を多数確認することができた。しかし、ウイルスゲノム全体をカバーすることができなかったため、さらに解析を進める。 (2)口白症ワクチンの開発:トラフグ脳の初代培養に口白症ウイルス(感染脳磨砕濾液)を接種し、ウイルスが増殖したのち、培養全体をホルマリン処理してトラフグに免疫した。その後、口白症を攻撃接種したところ、ワクチン接種後3日目に防御効果が見られた。免疫関連遺伝子の発現量を測定したところ、Ⅰ型インターフェロンの増加を認めた。ワクチン接種3日以降、ワクチンによる防御効果は低下したため、さらに効果の高いワクチンを作成する必要がある。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ゲノム解析、ワクチン開発とも、部分的に成功している。今年度中には完成する見込みである。
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今後の研究の推進方策 |
(1)完全長ゲノムを得るには至らなかった原因は、ウイルス感染後期の脳を出発材料にしたからと推測される。感染初期にはウイルスゲノムの複製量は少ないものの、完全長ゲノムを得ることが可能と考えられるため、これまでに得られた部分配列をプライマーとして用いて、完全長ゲノムをRT-PCRによって得ることができると考えている。 (2)感染細胞のワクチン効果は不完全であったことから、ゲノム配列をもとにしてリコンビナントワクチンの作成を試みる。
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次年度使用額が生じた理由 |
本年度はゲノムの解析作業にほとんどの時間を費やしたため、実験にかかる費用の支出が少なかった。
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次年度使用額の使用計画 |
解析結果を受けて、次年度は再び実験を行う予定であり、当該費用はその支出に充てる予定である。
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