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2017 年度 実績報告書

甲殻類の成熟を制御する内分泌系: 卵巣由来タンパク質ホルモン群の包括的解析

研究課題

研究課題/領域番号 15K07576
研究機関岡山大学

研究代表者

筒井 直昭  岡山大学, 理学部, 助教 (00643785)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワード甲殻類 / クルマエビ / ホルモン / 卵黄形成
研究実績の概要

トランスクリプトーム解析によって、クルマエビの卵巣での発現が確認されたホルモン様因子の組換え体を、可溶性タグとの融合タンパク質として大腸菌発現系を用いて作製することを試みた。発現タンパク質のうち、卵巣型甲殻類雌性ホルモン (Maj-CFSH-ov) では約30%、甲殻類血糖上昇ホルモン様ペプチド (Maj-pCHH-B) では約50%、ニューロパーシン様ペプチド (Maj-NPLP) では約80%が、大腸菌破砕物の可溶性画分に回収された。これらの融合タンパク質から、可溶性タグの除去、精製などを経て得られた組換え体は、質量分析の結果、いずれも想定される数の分子内ジスルフィド結合を持つと考えられた。クルマエビ卵巣の培養系を用いた生物検定において、Maj-CFSH-ovとMaj-pCHH-Bは、卵黄タンパク質前駆体であるビテロジェニン (Vg) の遺伝子発現に影響を与えなかった。一方で、Maj-NPLPにはVg発現を増加させる傾向がみられた。
各ホルモン様因子の主要な発現部位は、Maj-CFSH-ovが生殖腺、Maj-pCHH-BとMaj-NPLPが各神経節であった。また、トランスクリプトームデータの再解析により、ショウジョウバエのニューロパーシン受容体のホモログがクルマエビ卵巣で発現していることも判明した。
以上から、卵巣のトランスクリプトーム解析によって発見されたMaj-NPLPは、卵巣が主たる産生部位ではないものの、クルマエビの生殖制御に関与することが示唆された。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2018 2017

すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件) 学会発表 (4件) (うち国際学会 2件)

  • [雑誌論文] Characterization of distinct ovarian isoform of crustacean female sex hormone in the kuruma prawn Marsupenaeus japonicus2018

    • 著者名/発表者名
      Naoaki Tsutsui, Sayaka Kotaka, Tsuyoshi Ohira, Tatsuya Sakamoto
    • 雑誌名

      Comparative Biochemistry and Physiology Part A: Molecular & Integrative Physiology

      巻: 217 ページ: 7~16

    • DOI

      https://doi.org/10.1016/j.cbpa.2017.12.009

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Involvement of second messengers in the signaling pathway of vitellogenesis-inhibiting hormone and their effects on vitellogenin mRNA expression in the whiteleg shrimp, Litopenaeus vannamei2017

    • 著者名/発表者名
      Sun-Hye Bae, Tomoyuki Okutsu, Naoaki Tsutsui, Bong Jung Kang, Hsiang-Yin Chen, Marcy N. Wilder
    • 雑誌名

      General and Comparative Endocrinology

      巻: 246 ページ: 301~308

    • DOI

      http://dx.doi.org/10.1016/j.ygcen.2017.01.006

    • 査読あり / 国際共著
  • [学会発表] The search for hormone-like transcripts expressed in the prawn ovary using next generation sequencing.2017

    • 著者名/発表者名
      Naoaki Tsutsui, Sayaka Kotaka, Tsuyoshi Ohira, Yasuhisa Kobayashi, Tatsuya Sakamoto.
    • 学会等名
      14th International Congress on Invertebrate Reproduction and Development
    • 国際学会
  • [学会発表] Isolation and cDNA cloning of molt-inhibiting hormone (MIH) from the southern rough shrimp Trachysalambria curvirostris.2017

    • 著者名/発表者名
      Masafumi Hanazuka, Naoaki Tsutsui, Tsuyoshi Ohira.
    • 学会等名
      The Crustacean Society Mid-Year Meeting
    • 国際学会
  • [学会発表] クルマエビの卵巣で発現するペプチドホルモン様因子.2017

    • 著者名/発表者名
      筒井直昭, 坂本竜哉.
    • 学会等名
      第42回日本比較内分泌学会大会
  • [学会発表] クルマエビ甲殻類雌性ホルモンの周年変動2017

    • 著者名/発表者名
      甲高彩華, 筒井直昭, 大平剛
    • 学会等名
      第42回日本比較内分泌学会大会

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公開日: 2018-12-17  

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