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2016 年度 実施状況報告書

マダイ腹腔内脂肪組織の炎症反応

研究課題

研究課題/領域番号 15K07585
研究機関北里大学

研究代表者

中村 修  北里大学, 海洋生命科学部, 准教授 (00306648)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワード脂肪組織 / マダイ / 白血球
研究実績の概要

哺乳類では脂肪組織に多数の白血球が存在し、免疫反応や炎症に関わっていることが明らかになってきたが、魚類の脂肪組織について、免疫器官としての側面は明らかにされていない。
2年目となる28年度は、以下のような成果を得た。
・マダイの腹腔内脂肪組織をコラゲナーゼ処理して白血球を分離し、細胞の種類、構成比を末梢血白血球および腹腔細胞と比較した。脂肪組織の白血球は末梢血白血球とは大きく異なるが、腹腔細胞とはいくつかの類似点があった。腹腔細胞には末梢血に見られない、由来不明の白血球が含まれており、それが脂肪組織内に見られたことは興味深い。
・マダイのマクロファージマンノースレセプター(MMR)のcDNAをクローニングした。MMRはマクロファージや一部のリンパ管内皮細胞上に発現する膜タンパク質である。縮重プライマーを作製してPCRを行い、増幅断片から部分配列を得た。その後、RACE法によりcDNA全長を得た。現在、組み替え体タンパク質を作製中であり、作製できたらウサギに免疫して抗血清を得る。この抗体をもちいて免疫染色を行い、脂肪組織内のマクロファージを検出し、分布を調べる。
・脂肪組織白血球における各種白血球マーカーおよびサイトカインの発現解析を行い、興味深い結果を得た。未発表データであるため、詳細は差し控えたい。今後、腹腔内への抗原注射や、肥満が及ぼす発現変動を解析する。
これらのことから、マダイの腹腔内脂肪組織が免疫応答に関与し、炎症性サイトカインを分泌していることが確実になり、免疫器官としての重要性が裏付けられた。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

28年度中にMMRの抗体を作製し、免疫染色を行う予定だったが、cDNA全長のクローニングおよび組み替え体の作製に手間取ったため。

今後の研究の推進方策

現在、この研究を主に担当する大学院生1名に加え、卒論学生数名を関連テーマに配置した。

次年度使用額が生じた理由

たんに慎重に使用した結果であり、8213円という額はほぼ0に等しいと考える。

次年度使用額の使用計画

物品費として試薬等の購入に充てる。

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公開日: 2018-01-16  

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