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2015 年度 実施状況報告書

ウシ胎盤剥離メカニズムの解明と応用技術の開発

研究課題

研究課題/領域番号 15K07700
研究機関国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構

研究代表者

鎌田 八郎  国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 畜産研究部門・家畜育種繁殖研究領域, 主席研究員 (70360443)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワード胎盤 / 重層構造
研究実績の概要

ウシ胎盤由来線維芽細胞、牛子宮上皮細胞、ウシ受精卵を用いて、インビトロ胎盤構造モデル(子宮上皮―胎盤の重層構造)の構築を試みた。培養液DMEM中では受精卵は接着せず浮遊し、その後黒化退行した。前もって胎盤由来線維芽細胞を敷いておくと受精卵は接着しコロニーを形成したが、その後大きな変化はなく退行した。子宮上皮細胞を敷いた場合では受精卵は接着せず、上皮細胞の剥離が起きた。一方、子宮上皮細胞と胎盤線維芽細胞を混合して敷いた場合(混合培養)、受精卵は接着・コロニーを形成し、その後盛んに小胞を形成した。小胞は浮遊・再接着し、新たなコロニーを形成した。しかしコロニー形成した受精卵由来の栄養膜細胞は子宮上皮細胞を押しのけて伸展成長しており、重層構造は形成されなかった。先の混合培養系で発生した小胞を子宮上皮単層培養上にのせておくと、接着しないが数日後新たに子小胞を形成し、この小胞が子宮上皮細胞上に接着した。接着した栄養膜細胞はコロニー形成し、2次小胞を形成した。この小胞は上皮細胞接着能を維持しており、また無細胞のDMEMでも接着コロニー形成し継代が可能であった。このコロニーはヘキスト染色、ギムザ染色で栄養膜細胞の特徴である2核細胞を含んでいた。しかし、胎盤剥離誘導シグナルと推定されるオキソアラキドン酸で細胞剥離を誘導した場合、栄養膜細胞下に細胞はなく、重層構造は形成されていなかった。しかし、2重底ディッシュ(トランズウェル)に子宮上皮細胞と胎盤由来線維芽細胞を敷いておき、そこに受精卵を載せた場合に形成されるコロニーでは重層構造が確認できた。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

子宮上皮細胞と栄養膜細胞の重層構造が構築できた。

今後の研究の推進方策

妊娠経産牛において分娩誘起後高率で胎盤剥離誘導が達成される条件を明らかにする。

  • 研究成果

    (1件)

すべて 2015

すべて 学会発表 (1件) (うち国際学会 1件)

  • [学会発表] Effects of fetal membrane release induced by 12-oxoETE injection after delivery on the postpartum dairy cow performance.2015

    • 著者名/発表者名
      鎌田八郎、松井義貴
    • 学会等名
      European Association for Animal Production
    • 発表場所
      Warsaw Poland
    • 年月日
      2015-08-31 – 2015-09-04
    • 国際学会

URL: 

公開日: 2017-01-06  

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