ウシ乳腺組織におけるマイコプラズマの高度免疫回避機能に関する細胞生物学的研究

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K07749
• 研究機関: 酪農学園大学
• 研究代表者: 樋口 豪紀 酪農学園大学, 獣医学群, 教授 (00305905)
• 研究分担者: 鈴木 一由 酪農学園大学, 獣医学群, 教授 (30339296) ; 岩野 英知 酪農学園大学, 獣医学群, 教授 (60382488) ; 中島 恵一 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 北海道農業研究センター, 主任研究員 (70362150) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: Mycoplasma bovis / 好中球 / 単核急

研究実績の概要

本研究ではM. bovisが末梢血好中球および単核球の細胞死に及ぼす影響について検討した。研究概要は以下の通りである。①本研究において好中球にM. bovisを添加した際に、MOIの増加に従って細胞生存率の低下が認められた。これらのことから、M. bovisは菌数が増えるに従って好中球に細胞死を誘導することが示された。またM. bovisを好中球に添加することにより、対照群ではMOIの増加に伴ってアポトーシスが誘導された。②M. bovis刺激により誘導される好中球のcaspaseの活性は増加することが示された。さらにM. bovis刺激により、好中球のcaspase-3および9のmRNA発現量の増加が認められた。このことから、好中球においてM. bovisはcaspase-9および-3のmRNA発現量を増加することにより、細胞内のcaspase-9および-3の蛋白発現量を増加させることが示唆された。これらcaspase-9および-3の蛋白が活性化することにより、アポトーシスを誘導することが考えられた。③PBMCでも同様の試験を行ったところアポトーシスの抑制が認められた。PBMCにM. bovisを添加した際のcaspase活性は対照群では低下したのに対し、STS添加群では増加することが示された。PBMCにおいてM. bovisはcaspase-9および-3のmRNA発現量を減少させることで、細胞内のcaspase-9および-3の蛋白発現量を低下させ、アポトーシスを抑制することが考えられた。
以上本研究ではM. bovisが好中球およびPBMCの細胞死を調整することを示し、このことがM. bovisによって引き起こされる乳房炎を難治性へと招来することが考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Prevalence and risk factors of Mycoplasma bovis infection in dairy farms in T northern Japan (2019)
  • 著者名/発表者名: Kiyokazu Murai, Hidetoshi Higuchi.
  • 雑誌名: Res. Vet. Sci. 巻: 123 ページ: 29-31
• [雑誌論文] Innate immune response of bovine mammary epithelial cells to Mycoplasma bovis. (2018)
  • 著者名/発表者名: Gondaira, S., Higuchi, H., Iwano H., Nishi, K., Nebu, T., Nakajima, K, and Nagahata, H.
  • 雑誌名: J Vet Sci 巻: 19 ページ: 79-87
• [学会発表] 子牛マイコプラズマ性肺炎に対するワクチン開発 (2019)
  • 著者名/発表者名: ○渡来 仁、塔 娜、樋口豪紀、小岩政照
  • 学会等名: 日本獣医師会獣医学術学会
• [学会発表] Mycoplasma bovisにおけるエンロフロキサシン耐性遺伝子の迅速検出技術の開発とその応用 (2019)
  • 著者名/発表者名: ○権平 智、西 航司、岩野直美、臼井 優、田村 豊、樋口豪紀
  • 学会等名: 日本獣医師会獣医学術学会
• [学会発表] Mycoplasma bovis 特異抗原を用いたELISA系の構築 (2018)
  • 著者名/発表者名: 〇杉本侃司・西 航司・藤木純平・岩野英知・権平 智・樋口豪紀
  • 学会等名: 日本家畜衛生学会
• [学会発表] Mycoplasma bovisのウシ滑膜細胞に対する侵入と局在 (2018)
  • 著者名/発表者名: ○片方 美智子、西 航司、岡本 真理子、根布 貴則、藤木 純平、岩野 英知、萩原 克郎、権平 智、樋口 豪紀
  • 学会等名: 第161回日本獣医学会学術集会