| 研究実績の概要 |
植物抗原性糖鎖の骨格構造Man3Xyl1Fuc1GlcNAc2（M3FX）によるヒトTh2免疫応答の抑制機構を解明する研究の一環として，これまでに糖鎖を多価に結合させた種々の糖鎖ポリマー（植物抗原性・ハイマンノース型・動物複合型）の作製に成功した。そこで，本年度は（1）ヒト末梢血から単離したCD14+単球をIL-4とGM-CSF存在下で6日間培養し，誘導した未熟樹状細胞を用い，糖鎖ポリマーで2日間刺激を行い，分化マーカーである（CD80，CD86，HLA-DR）の発現をフローサイトメーターにより解析した。その結果，いずれの糖鎖ポリマーについてもCD80とCD86の発現への影響は確認できなかったが，植物抗原性糖鎖ポリマーはHLA-DRの発現を抑制し，M3FXの抗原提示抑制によるTh2免疫応答抑制への関与が示唆された。（2）自然免疫応答抑制活性を解析するためマウスマクロファージ培養細胞を用いた実験を行った。マウス分泌型アルカリホスファターゼ（SEAP）のレポーター細胞株（NFkB/SEAPoter RAW細胞）を播種し，LPS存在下，各種糖鎖ポリマーによる刺激を行った。24時間後，上清を回収し，SEAPの検出を行った。その結果，いずれの糖鎖ポリマーについてもLPSによるNFkB活性化の抑制には影響しないと考えられた。（3）スギおよびヒノキ花粉の主要アレルゲン（Cry j1，Cha o3）に結合しているN-グリカンは，M3FXの非還元末端がN-アセチルグルコサミン（GlcNAc）やルイスa抗原で修飾された構造を有する。これらの植物抗原性糖鎖を多価に結合した糖鎖ポリマーの作製を目的として，タケノコ糖タンパク質からAsn糖鎖の多量調整を行った。また，（4）植物抗原性糖鎖の抗原性低下に関与するトマトα1,3/4フコシダーゼの2種遺伝子のうち未報告の遺伝子産物について論文発表を行った。
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