ドラッグ・リポジショニングに立脚した原発性骨髄線維症の腫瘍性クローン選択的排除法

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K07972
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 後藤 明彦 順天堂大学, 医学部, 先任准教授 (00297293)
• 研究分担者: 小松 則夫 順天堂大学, 医学部, 教授 (50186798) ; 宮澤 啓介 東京医科大学, 医学部, 主任教授 (50209897)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: myelofibrosis / ruxolitinib / macrolide / thrombopietin / calreticulin

研究実績の概要

原発性骨髄線維症（PMF）の主要なドライバー変異であるcalreticulin（CALR）のtype1（del52）およびtype2（ins5）の変異遺伝子をPMFの病態の核となる巨核球系細胞のモデルとなるthrombopoietin（TPO）依存性細胞株UT-7/TPOに導入し、安定的変異遺伝子導入株を得た。ベクター遺伝子と野生型CALR遺伝子導入株をコントロールとして作成した。変異遺伝子導入株はTPO非依存性の増殖能を獲得しており、PMFの腫瘍性性格を反映していると考えられた。
クラリスロマイシン（CAM）は単独ではCALR変異陽性細胞に対する増殖抑制効果を示さなかったが、ルキソリチニブ（RUX）との併用によりRUXの細胞増殖抑制作用を増強した。なおCALR type2変異導入のクローンのうち1種ではRUXに高い耐性を示した。細胞内タンパクのチロシンリン化状態を検討するとRUX添加でリン酸化は効果的に抑制されたがCAM単独ではリン酸化抑制は認めず、RUXとCAMの併用でもRUX単独と著変はなく、CAMのRUXによる増殖抑制効果増強はJAK2の恒常的活性化によるチロシンリン酸化のレベルとは関係ないことが示された。また、RUX抵抗性を示したクローンではRUXによるチロシンリン酸化抑制が認められず、RUX耐性機序の一つとして記憶すべきと考えた。
無血清の条件下でLC3-IIの動態を詳細に観察するとCALR変異細胞では無血清下4時間までLC3-IIが経時的に増加するのが観察され、オートファジーが経時的に誘導されるのが示された。オートファジーを阻害するCAMはここをターゲットとしてRUXの作用を増強している可能性があり、安全性の確立したマクロライドのドラッグリポジショニングによるRUXとの併用はRUXの臨床効果を高めるのに有望な選択と考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Evidence for prevention of renal dysfunction associated with primary myelofibrosis by cytoreductive therapy (2019)
  • 著者名/発表者名: Fukuda Yasutaka、Araki Marito、Yamamoto Kouji、Morishita Soji、Inano Tadaaki、Misawa Kyohei、Ochiai Tomonori、Edahiro Yoko、Imai Misa、Yasuda Hajime、Gotoh Akihiko、Ohsaka Akimichi、Komatsu Norio
  • 雑誌名: Haematologica 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.3324/haematol.2018.208876
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Pomalidomideが著効し輸血依存から離脱した原発性骨髄線維症 (2018)
  • 著者名/発表者名: 枝廣 陽子, 後藤 明彦, 稲野 資明, 筒井 深雪, 築根 豊, 安田 肇, 小松 則夫
  • 雑誌名: 臨床血液 巻: 59 ページ: 323-325
  • DOI: 10.11406/rinketsu.59.323
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutational subtypes of JAK2 and CALR correlate with different clinical features in Japanese patients with myeloproliferative neoplasms (2018)
  • 著者名/発表者名: Misawa Kyohei、Yasuda Hajime、Araki Marito、Ochiai Tomonori、Morishita Soji、Shirane Shuichi、Edahiro Yoko、Gotoh Akihiko、Ohsaka Akimichi、Komatsu Norio
  • 雑誌名: International Journal of Hematology 巻: 107 ページ: 673～680
  • DOI: 10.1007/s12185-018-2421-7
  • 査読あり
• [雑誌論文] The 2014 BCSH criteria and the 2016 WHO criteria for essential thrombocythemia: A comparison in a large-scale cohort (2018)
  • 著者名/発表者名: Ochiai Tomonori、Yasuda Hajime、Araki Marito、Misawa Kyohei、Morishita Soji、Nudejima Mai、Hironaka Yumi、Shirane Shuichi、Edahiro Yoko、Gotoh Akihiko、Ohsaka Akimichi、Komatsu Norio
  • 雑誌名: European Journal of Haematology 巻: 100 ページ: 544～549
  • DOI: 10.1111/ejh.13041
  • 査読あり
• [雑誌論文] Designing an effective drug combination for ER stress loading in cancer therapy using a real-time monitoring system (2018)
  • 著者名/発表者名: Kazama Hiromi、Hiramoto Masaki、Miyahara Kana、Takano Naoharu、Miyazawa Keisuke
  • 雑誌名: Biochemical and Biophysical Research Communications 巻: 501 ページ: 286～292
  • DOI: 10.1016/j.bbrc.2018.05.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Amino acid starvation culture condition sensitizes EGFR-expressing cancer cell lines to gefitinib-mediated cytotoxicity by inducing atypical necroptosis (2018)
  • 著者名/発表者名: Saito Yu、Moriya Shota、Kazama Hiromi、Hirasawa Kazuhiro、Miyahara Kana、Kokuba Hiroko、Hino Hirotsugu、Kikuchi Hiroyuki、Takano Naoharu、Hiramoto Masaki、Tsukahara Kiyoaki、Miyazawa Keisuke
  • 雑誌名: International Journal of Oncology 巻: 52 ページ: 1165-1177
  • DOI: 10.3892/ijo.2018.4282
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Mutant molecular chaperone activates cytokine receptor as a homomultimer (2018)
  • 著者名/発表者名: Araki Marito、Komatsu Norio
  • 雑誌名: Oncotarget 巻: 9 ページ: 35201-35202
  • DOI: 10.18632/oncotarget.26221
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Multiple Placental Infarcts in a Pregnant Woman with Essential Thrombocythemia (2018)
  • 著者名/発表者名: Edahiro Yoko、Ando Jun、Suzuki Toshifumi、Fukumura Yuki、Masuda Azuchi、Sakayori Shiori、Takeda Jun、Maruyama Yojiro、Makino Shintaro、Itakura Atsuo、Komatsu Norio
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 57 ページ: 3647～3650
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.1311-18
  • 査読あり
• [雑誌論文] Homomultimerization of mutant calreticulin is a prerequisite for MPL binding and activation (2018)
  • 著者名/発表者名: Araki Marito、Yang Yinjie、Imai Misa、Mizukami Yoshihisa、Kihara Yoshihiko、Sunami Yoshitaka、Masubuchi Nami、Edahiro Yoko、Hironaka Yumi、Osaga Satoshi、Ohsaka Akimichi、Komatsu Norio
  • 雑誌名: Leukemia 巻: 33 ページ: 122～131
  • DOI: 10.1038/s41375-018-0181-2
  • 査読あり
• [雑誌論文] Skewed megakaryopoiesis in human induced pluripotent stem?cell-derived haematopoietic progenitor cells harbouring calreticulin mutations (2018)
  • 著者名/発表者名: Takei Hiraku、Edahiro Yoko、Mano Shuichi、Masubuchi Nami、Mizukami Yoshihisa、Imai Misa、Morishita Soji、Misawa Kyohei、Ochiai Tomonori、Tsuneda Satoshi、Endo Hiroshi、Nakamura Sou、Eto Koji、Ohsaka Akimichi、Araki Marito、Komatsu Norio
  • 雑誌名: British Journal of Haematology 巻: 181 ページ: 791～802
  • DOI: 10.1111/bjh.15266
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effect of ruxolitinib therapy on the quality-of-life of Japanese patients with myelofibrosis (2018)
  • 著者名/発表者名: Oritani Kenji、Ohishi Kohshi、Okamoto Shinichiro、Kirito Keita、Komatsu Norio、Tauchi Tetsuzo、Handa Hiroshi、Saito Shigeki、Takenaka Katsuto、Shimoda Kazuya、Okada Hikaru、Amagasaki Taro、Wakase Shiho、Shimozuma Kojiro、Akashi Koichi
  • 雑誌名: Current Medical Research and Opinion 巻: 34 ページ: 531～537
  • DOI: 10.1080/03007995.2017.1415874
  • 査読あり
• [雑誌論文] Meet the MPN experts in EHA フィラデルフィア染色体陰性MPNの診断・治療の課題と将来展望 MPNを巡る臨床的課題と将来展望を語る(座談会) (2018)
  • 著者名/発表者名: 小松 則夫, Kiladjian Jean-Jacques, ROY Lydia, Shih Lee-Yung, Chen Chin-Cheng, 後藤 明彦
  • 雑誌名: 血液フロンティア 巻: 28 ページ: 263-267
• [学会発表] Copy number of JAK2V617 modulates human hematopoietic cell differentiation . (2018)
  • 著者名/発表者名: Edahiro Y, Mano S, Takei H, Li L, Morishita S, Gotoh A, Tsuneta S, Osaka A, Araki M, Komatsu N
  • 学会等名: 8th International Conference on Myeloproliferative Neoplasms
  • 国際学会
• [学会発表] Clinical and molecular features of patients with triple-negative essential thrombocythemia. (2018)
  • 著者名/発表者名: Inano T, Araki M, Fukuda Y, Morishita S, Ochiai T, Misawa K, Ito M, Yamamoto K, Yang Y, Taguchi T, Edahiro Y, Imai M, Gotoh A, Osaka A, Komatsu N.
  • 学会等名: 第80回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Cytoreductive therapy prevents worsening of renal function in patients with primary myelofibrosis. (2018)
  • 著者名/発表者名: Fukuda Y, Araki M, Imamoto K, Morishita S, Inano T, Misawa K, Ochiai T, Edahiro Y, Imai M, Gotoh A, Osaka A, Komatsu N.
  • 学会等名: 第80回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Interferon therapy for pregnant patients with myeloproliferative neoplasms. (2018)
  • 著者名/発表者名: Edahiro Y, Gotoh A, Ando J, Tsutsui M, Morishita S, Osaka A, Komatsu N.
  • 学会等名: 第80回日本血液学会学術集会