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2017 年度 実績報告書

腎臓近位尿細管の領域特異的カドミウム輸送機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 15K08054
研究機関徳島文理大学

研究代表者

藤代 瞳  徳島文理大学, 薬学部, 講師 (10389182)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワードカドミウム / 輸送 / 近位尿細管 / 腎障害
研究実績の概要

本研究者らはこれまでにCdの細胞内への取り込みにZn輸送体ZIP8, ZIP14が重要な役割を果たすことを見出してきた。本研究はCd毒性の標的組織である腎臓におけるCdの輸送機構を詳細に明らかにするために、近位尿細管のS1、S2、S3それぞれの領域から作成した不死化細胞を活用し、尿細管の部位特異的な輸送機構の解明を目指した。1.昨年度までに腎障害マーカーであるKim-1がS1, S2, S3細胞においてCdによって誘導されることを明らかにしたが、今年度はカップ培養システムを用いて管腔側からCdを添加した時の変化を解析した。通常のシャーレ培養と一致してS1, S2, S3細胞すべてでCd添加によりKim-1のmRNAレベルの誘導が見られた。しかし、カップ培養システムを用いて培地中に分泌されるKim-1のタンパク質量をELISA法で測定しようと試みたが、上手くいかなかった。2.Cd-MTの細胞内取り込みおよび細胞毒性についてS1, S2, S3細胞で評価するため、大腸菌系を用いてmouse MT-Iタンパク質の大量精製を行った。pGEX-4T-1vectorに変更することにより精製に成功した。しかしmouse MT-Iを使用した実験は今後の課題となった。3.Cd2+の取り込み効率が高いS3細胞におけるZIP8の寄与を明らかにするためCRISPR-Cas9系を用いて発現抑制を行った。しかし、恒常的にZIP8の発現が低下した細胞の作成を試みたが、発現低下を維持した細胞は作成できなかった。今後transientにZIP8を発現抑制した系でS3細胞におけるZIP8の寄与度を明らかにしていきたい。

  • 研究成果

    (12件)

すべて 2018 2017 その他

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (8件) (うち招待講演 2件) 備考 (2件)

  • [雑誌論文] Concentration-dependent roles of DMT1 and ZIP14 in cadmium absorption in Caco-2 cells.2017

    • 著者名/発表者名
      Fujishiro, H., Hamao, S., Tanaka, R., Kambe, T., Himeno S.
    • 雑誌名

      J. Toxicol. Sci.

      巻: 42(5) ページ: 559-567

    • DOI

      10.2131/jts.42.559.

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Terminology of elemental speciation - An IUPAC perspective.2017

    • 著者名/発表者名
      Templeton, D.M., Fujishiro, H.
    • 雑誌名

      Coord. Chem. Rev.

      巻: 352 ページ: 424-431

    • DOI

      org/10.1016/j.ccr.2017.02.002

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] Lead accumulation and cytotoxicity in segment-specific kidney proximal tubule cells.2018

    • 著者名/発表者名
      〇Minerva Martinez- Alfaro, Hitomi Fujishiro, Seiichiro Himeno
    • 学会等名
      日本薬学会138年会
  • [学会発表] DT40細胞における亜鉛輸送体ZIP8の変異によるマンガン輸送の変化2018

    • 著者名/発表者名
      〇宮崎寿和、藤代瞳、神戸大朋、姫野誠一郎
    • 学会等名
      日本薬学会138年会
  • [学会発表] 培養細胞を用いたカドミウムによる近位尿細管再吸収障害の評価2018

    • 著者名/発表者名
      〇岡奈々恵、藤代瞳、姫野誠一郎
    • 学会等名
      日本薬学会138年会
  • [学会発表] 腎臓の様々な部位由来細胞を用いたカドミウム毒性発現機構の解析2017

    • 著者名/発表者名
      〇藤代瞳、姫野誠一郎.
    • 学会等名
      第44回日本毒性学会学術総会
    • 招待講演
  • [学会発表] 腎臓近位尿細管における有害金属および薬物の毒性と動態の解析2017

    • 著者名/発表者名
      〇藤代瞳
    • 学会等名
      分子研研究会
  • [学会発表] 近位尿細管S1, S2, S3領域の活性酸素種感受性の差異2017

    • 著者名/発表者名
      ◯藤代瞳,山上りえ、姫野誠一郎.
    • 学会等名
      フォーラム2017:衛生薬学・環境トキシコロジー
  • [学会発表] カドミウムによる近位尿細管再吸収障害機構のin vitro解析2017

    • 著者名/発表者名
      ◯大寺信輝,山本葉月,藤代瞳, 姫野誠一郎
    • 学会等名
      フォーラム2017:衛生薬学・環境トキシコロジー
  • [学会発表] 腎臓近位尿細管における生体金属の動的な輸送機構と生体影響の解析2017

    • 著者名/発表者名
      〇藤代瞳、姫野誠一郎
    • 学会等名
      生命化学系学会合同年次大会(ConBio2017)
    • 招待講演
  • [備考] 徳島文理大学薬学部

    • URL

      http://p.bunri-u.ac.jp/

  • [備考] 徳島文理大学薬学部衛生化学講座

    • URL

      http://p.bunri-u.ac.jp/lab10/index.html

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公開日: 2018-12-17  

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