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2015 年度 実施状況報告書

δ-プロトカドヘリンの中枢神経系および頭部器官の発生・構造維持における機能的意義

研究課題

研究課題/領域番号 15K08128
研究機関群馬大学

研究代表者

村上 徹  群馬大学, 医学(系)研究科(研究院), 准教授 (10239494)

研究期間 (年度) 2015-04-01 – 2018-03-31
キーワード発生学・形態形成学 / 細胞接着因子 / プロトカドヘリン / ゼブラフィッシュ / 3D画像解析
研究実績の概要

平成27年度はゼブラフィッシュ成魚の形態を3D画像で解析する方法を調査・開発し、結果を米国細胞生物学会と日本解剖学会で発表した(*)。
1.クライオスタットを用いたシリアルブロックフェイスイメージング:一般的なクライオスタット(凍結切片作成装置)に市販のデジタル一眼レフカメラを取り付け、試料ブロックの切削面をマクロ撮影した。この際、クライオスタットのモーターとカメラとを同期させる装置を自作し、自動的に連続撮影できるようにした。撮影した画像をボリュームデータ(xyzの3方向の画像データ)にまとめ、医療用の画像処理ソフトウエアを用いて任意断面像や3D像を作成した。
2.滑走式ミクロトームを用いたシリアルブロックフェイスイメージング:滑走式ミクロトーム(ナイフが試料上を滑走するタイプの切片作成装置)を用い、上と同様に試料の切削面を連続撮影した。樹脂包埋した試料の場合、試料が半透明なために切削面だけの良好な画像が得られなかった。そのため、滑走式ミクロトームに取り付けられる凍結装置を用い、凍結試料を使った。試料がぶれないので良好なボリュームデータを得られた。
* ASCB Annual Meeting, San Diego, December 12-16, 2015 / 第121回日本解剖学会総会・全国学術集会, 郡山市, 2016.3.27-30.

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

次の理由により、進捗がやや遅れた。
1.当初予定していた滑走式ミクロトーム(既存)が故障し修理不能になったため、次年度に計画を先送りすることになった。
2.切片作成装置とカメラとを同期させる装置の制作で、電気的な不整合の解決に手間取った。

今後の研究の推進方策

平成28年度以降は次のように研究を推進する。
1.滑走式ミクロトームを用いたシリアルブロックイメージングの完成:新規の滑走式ミクロトームを導入し、それを用いたシリアルブロックイメージングの開発を継続し、完成させる。
2.シリアルブロックフェイスイメージングによる遺伝子発現解析技術の開発:ゼブラフィッシュ成魚や胚の全載標本について、遺伝子染色技術を開発し、シリアルブロックフェイスイメージングによって解析する。

次年度使用額が生じた理由

当初予定した滑走式ミクロトーム(既存)が故障し使用不能になったため、それに関する計画を中断し、次年度にミクロトームを新規購入することとしたため。

次年度使用額の使用計画

滑走式ミクロトームを新規購入する。

備考

本研究計画を含む実験方法をまとめたwebページを作成した。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2016 2015 その他

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (2件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] 臨床への解剖学2016

    • 著者名/発表者名
      村上 徹
    • 雑誌名

      日本生理学学会雑誌

      巻: 78 ページ: 未定

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] Visible Fish Danio rerio2016

    • 著者名/発表者名
      村上 徹, 多鹿友喜, 上野仁之, 池澤麻衣子, 依藤 宏
    • 学会等名
      第121回日本解剖学会総会・全国学術集会
    • 発表場所
      ビッグパレットふくしま(福島県郡山市)
    • 年月日
      2016-03-30 – 2016-03-30
  • [学会発表] Serial block-face imaging system for both 3D morphology and section histology2015

    • 著者名/発表者名
      Yuki Tajika, Tohru Murakami, Maiko Takahashi, Hitoshi Ueno, Hiroshi Yorifuji
    • 学会等名
      ASCB Annual Meeting
    • 発表場所
      Moscone Center (San Diego, USA)
    • 年月日
      2015-12-12 – 2015-12-16
  • [備考] Protocols

    • URL

      http://anatomy.med.gunma-u.ac.jp/protocols/

URL: 

公開日: 2017-01-06  

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