研究課題/領域番号 |
15K08143
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研究機関 | 岩手医科大学 |
研究代表者 |
燕 軍 岩手医科大学, 医学部, 准教授 (20316350)
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研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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キーワード | 内臓神経線維 / 結腸 / 上下腹神経叢 / 下下腹神経叢 / 骨盤神経叢 / 腸内神経叢 / 順行性標識 / ラット |
研究実績の概要 |
本研究はまず、マクロ解剖の手法を利用し、ヒトの「後腹壁を走行する」内臓神経線維を詳細に観察し、実験動物のラットのその神経線維と比較して、さらに動物実験で「結腸に分布する副交感神経線維」の由来、分布領域、外来性内臓神経と腸内神経線維との関係を順・逆行性神経線維標識法、免役染色法及び発生学的手法で明確にする。 今までの観察により、上下腹神経叢においてヒトとラットの間に大きい違いはないことをわかった。一方、結腸に分布する骨盤由来の「副交感神経線維」がもし存在するとすれば、「下下腹神経叢」の成分だと推測される。この結果を踏まえて中腸に分布する副交感神経線維成分を同定する必要があると考え、同じく齧歯類のトランスジェニックマウス初期胚を用い、切片標本をVIP副交感神経線維染色し、二重標識で中腸初期発生段階において血管及び血管に沿って走行する副交感神経線維成分を観察する方法を確立した。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
いままで、ラットを麻酔し手術で内臓神経を標識されてきた。らっと内臓神経とりわけ下下腹神経叢の繊維が非常に細くて、その神経線維の標識がとても精細で時間がかかった。 現在、手術により内臓神経標識のことを一段落になって、これからトランスジェニックマウスの実験にはいるので、一回数匹のマウス胎児を入手できるようになったことが一要因であることが考えられる
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今後の研究の推進方策 |
トランスジェニックマウスFlk1の初期胚(E12.5~E18.5)を用いて、切片(水平断面と前頭断面)にして、VIP副交感神経特異染色法で染色する。同時に、骨盤血管神経が観察しやすいホールマントトランスジェニックマウス標本もVIP 法で染色する。この二重染色法により、実験動物マウス(ラット)の中・後腸に分布する副交感神経線維成分の実像を明確にする。
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次年度使用額が生じた理由 |
動物事件センターの勧告で、実験動物ラットの使用数はできるだけ少な目にして、それに薬品の使用量も減らされたので、次年度の発生学実験に使うことにした。
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次年度使用額の使用計画 |
トランスジェニックマウスを購入すると抗体及び標識薬品の購入(必要に応じて標識実験の追加等)に使用する予定。
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