| 研究課題/領域番号 |
15K08256
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| 研究機関 | 東北医科薬科大学 |
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研究代表者 |
猪瀬 敦史 (丸山敦史) 東北医科薬科大学, 薬学部, 講師 (10431438)
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| 研究期間 (年度) |
2015-10-21 – 2018-03-31
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| キーワード | ヘムオキシゲナーゼー１ / ノンコーディングRNA / AKR1C1 / ヒ素応答 |
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| 研究実績の概要 |
本年度は以下の検討を行った。
・eRNA E2-3発現抑制によるコファクター機能への影響：最近、enhancer RNA(eRNA)が転写共役因子（コファクター）の機能に関与するとの報告があった。ヘムオキシゲナーゼ‐1(HO-1)遺伝子発現増強にはBRG1およびCBPが関与する。そこで、HO-1遺伝子エンハンサー領域由来ノンコーディングRNA eRNA E2-3がBRG1およびCBPの機能に影響を及ぼすか否かを検討するために、eRNAE2-3ノックダウン細胞のBRG-1およびCBP発現を検討した。その結果、BRG1はeRNAE2-3発現抑制細胞において発現低下が観察された。今後はBRG1とCBPのエンハンサー結合における影響を検討したい。
・eRNA E2-3の新たな標的遺伝子の同定：eRNA E2-3がHO-1遺伝子のみを制御するのか否かを検討するために、eRNAE2-3ノックダウン細胞を用いてマイクロアレイを行った。その結果、eRNA E2-3発現抑制によりDEM誘導が低下する遺伝子としてAKR1C1、AKR1B10を同定した。これらのうちAKR1C1遺伝子発現は、eRNAE2-3ノックダウン細胞ではDEM誘導が低下するが、HO-1遺伝子ノックダウン細胞では低下しなかった。そのためAKR1C1はeRNAE2-3により制御される遺伝子であると考えられた。
・ヒ素暴露におけるeRNA E2-3の影響：ヒ素は環境中に広く存在する元素であり、中でも亜ヒ酸は毒性が強く、酸化ストレスを引き起こす。HO-1遺伝子発現はヒ素により強く誘導されることが報告されている。そこでヒ素暴露時におけるHO-1発現増強にeRNA E2-3が関与するか否かを検討した。その結果、HeLa細胞においてeRNA E2-3発現を抑制すると、亜ヒ酸によるHO-1タンパク質発現が顕著に低下した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
・昨年からの課題であった、eRNAE2-3に相互作用するタンパク質の同定に至っていない。
・AKR1C1遺伝子がeRNAE2-3により制御を受けることがわかった。
・eRNAE2-3がBRG1発現に影響する可能性を見出した。
・eRNAE2-3が亜ヒ酸暴露によるHO-1発現増強に関与することがわかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
・平成29年度が最終年度であるのでこれまでの研究成果を、原著論文としてまとめたい。
・AKR1C1遺伝子がeRNAE2-3により制御を受けることが分かった。
・AKR1C1遺伝子発現がBRG1により制御される可能性がある。そのため、BRG1およびeRNAE2-3がどのようにHO-1およびAKR1C1遺伝子発現を制御するのかを検討したい。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
・参加学会が仙台に集中したため、旅費の出費が抑えられたから。
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| 次年度使用額の使用計画 |
・消耗品、旅費、その他の経費として使用する予定である。
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