| 研究実績の概要 |
・これまでにeRNAE2-3により発現が制御される遺伝子として、HO-1およびAKR1C1を見出した。ヒトAKR1C1遺伝子は10番染色体に存在し、eRNAE2-3およびヒトHO-1遺伝子が存在する22番染色体とは異なる。またeRNAE2-3発現抑制により、HO-1およびAKR1C1遺伝子プロモーター領域へのPolII結合増強が減弱することがわかった。そのためeRNAE2-3がPolII活性化ドメインを介して、異なる染色体上の遺伝子座を空間的に近接させ、遺伝子発現を制御させるとの着想を得た。そこで、細胞核内におけるPolIIおよびHO-1,ARK1C1遺伝子座を可視化するためにFISH解析の検討を行った。これまでに、仮説を実証する結果は得られていないため、実験条件を検討する必要がある。
・ヒ素暴露時におけるHO-1発現増強にeRNAE2-3が関与するか否かを検討した。HaCaT細胞を用いて検討した結果、eRNAE2-3発現を抑制すると、ヒ素によるHO-1タンパク質発現増強が低下することがわかった。
・昨年度までにAKR1C1遺伝子がeRNAE2-3の標的であることを発見した。そこで、AKR1C1タンパク質発現にeRNAE2-3が影響するか否かを検討した。HaCaT細胞においてeRNAE2-3発現を抑制したが、ヒ素処理によるAKR1C1タンパク質発現に変化は認められなかった。しかし、陰性対照細胞においてもヒ素処理によるAKR1C1タンパク質発現増強は認められなかった。
・HO-1発現を制御する新たな因子について検討を行うこととした。これまでに抗アポトーシス因子BAG-1がHO-1発現に関与することが報告されている。今後HO-1発現におけるBAG-1の機能について解析を進めていきたいと考えている。
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