| 研究課題/領域番号 |
15K08311
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| 研究機関 | 宮崎大学 |
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研究代表者 |
川口 真紀子 宮崎大学, 医学部, 助教 (90405598)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | HAI-1 / PAR-2 / 腸管発癌 / セリンプロテアーゼ / セリンプロテアーゼインヒビター |
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| 研究実績の概要 |
Hepatocyte growth factor activator inhibitor type 1 (HAI-1)ノックアウト（KO)マウスでは 腸管発癌が亢進している。その分子機序を解明するためにHAI-1 KOマウス及びHAI-1の標的酵素の基質であるProtease - activated receptor -2（PAR-2）とHAI-1のダブルKOマウスを用いてアゾキシメタン、デキストラン硫酸(AOM/DSS)投与による炎症関連大腸化学発癌モデルと、多段階発癌モデルマウスであるApcMin/+マウスの２つの腸管発癌モデルマウスを作製した。昨年度からさらにモデル数を増やし、腫瘍発生数を検討したところ、多段階発癌モデルマウスではPAR-2 KOにより、HAI-1 KO で増加した腫瘍発生数が抑制されることを見出した。AOM/DSSによる化学発癌モデルでは腫瘍発生数にPAR-2発現の有無は関連がみられなかった。
また、HAI-1欠失ApcMin/+マウスにNF-ｋB阻害剤であるDHMEQを投与したところ、腫瘍発生数が有意に抑制された。これらの結果からHAI-1 KOマウスでは、PAR-2活性化によるNF-ｋBシグナル活性化により、腸管発癌が亢進している可能性が示唆された。
大腸癌細胞株SW480を用いた検討では、HAI-1の強制発現および、HAI-1の類似蛋白であるHAI-2のノックアウト細胞株を樹立し、検討を行った。昨年度HAI-1を発現させると増殖能は亢進するが、遊走・浸潤能は低下することを見出したが、HAI-2ノックアウト株では増殖・遊走・浸潤能がすべて低下することがわかった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
HAI-1欠失による腸管発癌亢進について、HAI-1標的酵素の基質であるPAR-2に着目し、実験を開始したが、KOマウスの結果から、HAI-1 KOによるPAR-2の影響を強く示唆する結果が得られており、当初の予定通りに進展していると考えられる。
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| 今後の研究の推進方策 |
化学発癌モデルにおいて、HAI-1KOによる腸管発癌亢進の原因についてはまだ不明である。モデル数を増やして検討を続けるとともに、PAR-2以外のHAI-1標的酵素の基質にも着目し、まずは免疫染色やウェスタンブロットでその発現や活性化状態を確認する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
学会発表のための旅費の1部を、別予算から算出したため、差額が生じた。
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| 次年度使用額の使用計画 |
使用するマウスのジェノタイピングのための費用にあてる計画である。
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