LentiPlexを利用したTN乳癌の新たな組織学的亜分類の試み

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K08339
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 小山 徹也 群馬大学, 大学院医学系研究科, 教授 (50233622)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: breast / TNBC / shRNA / CASP14 / CPA4

研究実績の概要

乳癌の中で、Triple negative breast cancer (TNBC)はER,PgR HER2陰性のホルモ治療、分子標的治療耐性の乳癌である。Lenti PlexをBasal-like TNBC とnon-TNBCの細胞株に対して、Puromycinで細胞を選択し、次世代シークエンサーを用いて細胞内に残存するshRNAを同定することにより、Basal-like特異的に細胞障害性を持つ、shRNA候補の抽出を試みた。一方TNBC細胞株3株、non-TNBC細胞株3株を用いてTNBC高発現遺伝子をRNAシークエンス法で検索し、さらに公共データベースRefExを利用して正常組織で低発現である遺伝子をTNBC特異的高発現遺伝子として同定した。両方の方法で検索された遺伝子でから， Caspase 14 (CASP14)とCPA4 (Carboxypeptidase A4) に関して、臨床検体のtissue microarryを用いた免疫組織学的検討とCell limeを用いた抑制実験を行った。
CASP14は主に癌細胞質、核内で発現し非癌乳腺組織、間質細胞では低発現であった。またCASP14高発現群はTNBC症例で有意に多く、高核異型度、ER陰性、EGFR高発現、Ki67 LI高値症例が有意に多く、ALDH1, CD44, CD24との相関がみられた。CASP14の癌の悪性度、癌幹細胞との関連が示唆された。
CPA4はE-cadherin発現の低下、 CD44の上昇CD24の低下といった癌幹細胞マーカーと関与し、予後不良因子であった。 細胞培養の検討でCPA4の抑制が生存や運動抑制に関与し、E-cadherinの発言が上昇した。以上からCPA4は乳癌のEMT (epithelial mesenchymal transition)に関与し、TNBCの治療標的になることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Expression patterns of claudins in patients with triple-negative breast cancer are associated with nodal metastasis and worse outcome. (2017)
  • 著者名/発表者名: Katayama A, Handa T, Komatsu K, Togo M, Horiguchi J, Nishiyama M, Oyama T.
  • 雑誌名: Pathol Int. 巻: 67(8) ページ: 404-413
  • DOI: 10.1111/pin.12560.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Caspase14 expression is associated with triple negative phenotypes and cancer stem cell marker expression in breast cancer patients. (2017)
  • 著者名/発表者名: Handa T, Katayama A, Yokobori T, Yamane A, Horiguchi J, Kawabata-Iwakawa R, Rokudai S, Bao P, Gombodorj N, Altan B, Kaira K, Asao T, Kuwano H, Nishiyama M, Oyama T.
  • 雑誌名: J Surg Oncol. 巻: 116(6) ページ: 706-715.
  • DOI: 10.1002/jso.24705.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Stathmin1 expression is associated with aggressive phenotypes and cancer stem cell marker expression in breast cancer patients. (2017)
  • 著者名/発表者名: Obayashi S, Horiguchi J, Higuchi T, Katayama A, Handa T, Altan B, Bai T, Bao P, Bao H, Yokobori T, Nishiyama M, Oyama T, Kuwano H.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 巻: 51(3) ページ: 781-790.
  • DOI: 10.3892/ijo.2017.4085.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Clinical significance of new treatment target candidate Carboxypeptidase A4 (CPA4) expression in the triple negative breast cancer (2018)
  • 著者名/発表者名: 半田正、片山彩香、横堀武彦、山根有人、川端麗香、藤井孝明、佐野孝昭、西山正彦、小山徹也
  • 学会等名: 第107回日本病理学会総会（予定）
• [学会発表] Caspase14 expression is associated with triple negative phenotypes and cancer stem cell marker expression in breast cancer patients. (2018)
  • 著者名/発表者名: Y Ishikawa, T Handa, A Katayama, T Fujii, J Horiguchi, Y Iino, T Fujita, T Oyama
  • 学会等名: European Breast Cancer Conference 11
  • 国際学会
• [学会発表] Clinical significance of IGF2BP3 expression in Triple Negative Breast Cancers (2017)
  • 著者名/発表者名: 半田正、横堀武彦、片山彩香、山根有人、川端麗香、吉山伸司、堀口淳、佐野孝昭、西山正彦、小山徹也
  • 学会等名: 第106会日本病理学会総会