プロテオミクスに基づく新規の抗肝炎ウイルス戦略

2016 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 15K08493
• 研究機関: 山梨大学
• 研究代表者: 森石 恆司 山梨大学, 総合研究部, 教授 (90260273)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: C型肝炎 / B型肝炎 / HCV / HBV / 抗ウイルス化合物

研究実績の概要

前年度Protein-Protein interaction スクリーニング系の構築を行い、HCVコアタンパクと機能的に結合するPA28γの評価系を使っていくつかのHCV阻害剤候補を同定した。また、HCVコアによる膜蛋白質2ハイブリットで同定された膜内蛋白質分解酵素に対するプロテアーゼ阻害剤をスクリーニングし、抗HCV剤候補としてLY411575を同定し、ウイルス産生に阻害効果があることを明らかにした。LY411575はウイルスコア蛋白質の成熟を抑制し、コアの分解を促進することで、ウイルス粒子形成を阻害することが示唆された。レプリコン細胞系および培養細胞感染系に対して抗ウイルス効果を検討した結果、この化合物はウイルス複製に対して効果は低く、ウイルス粒子産生に抑制効果を示した。また、抗HBV複製阻害剤(NS5A阻害剤）Daclatasvirの複製阻害効果に対して相乗効果は認められず、ウイルス産生阻害効果に相乗効果があった。さらに、LY411575はウイルス感染による酸化ストレスを軽減し、がん化に関与する因子の産生増加を軽減した。以上のことから、抗ウイルス活性だけでなく、抗がん化作用も期待できることが分かった。さらにCDK阻害剤をHBV感染培養系でスクリーニングし、p-TEFb阻害剤に抗HBV活性があることを見いだした。HBV感染培養細胞系においてウイルスRNA、粒子内DNA、ウイルス感染粒子の産生を有意に阻害した。また、ウイルスを持続的に産生する細胞系でウイルス産生を有意に阻害した。さらに、ヒト肝臓キメラマウスにおいて、in vivoにおけるETVの抗ウイルス活性を増強した。この結果は新たな抗HBV剤開発への貢献に繋がると思われる。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

ほぼ順調に研究は進呈しており、現時点で問題はない。

今後の研究の推進方策

研究計画に変更はなく、同定した抗ウイルス化合物および標的因子の解析を通じ、新規抗肝炎ウイルス剤開発に繋げる。

研究成果

• [雑誌論文] Hepatocyte Factor JMJD5 Regulates Hepatitis B Virus Replication through Interaction with HBx (2016)
  • 著者名/発表者名: Kouwaki T, Okamoto T, Ito A, Sugiyama Y, Yamashita K, Suzuki T, Kusakabe S, Hirano J, Fukuhara T, Yamashita A, Saito K, Okuzaki D, Watashi K, Sugiyama M, Yoshio S, Standley DM, Kanto T, Mizokami M, Moriishi K, Matsuura Y.
  • 雑誌名: Journal of Virology 巻: 7 ページ: 3530-3542
  • DOI: 10.1128/JVI.02776-15.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibitory effect of CDK9 inhibitor FIT-039 on hepatitis B virus propagation (2016)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T, Okuyama-Dobashi K, Murakami S, Chen W, Okamoto T, Ueda K, Hosoya T, Matsuura Y, Ryo A, Tanaka Y, Hagiwara M, Moriishi K.
  • 雑誌名: Antiviral Research 巻: 133 ページ: 156-64
  • DOI: 10.1016/j.antiviral.2016.08.008.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibitory effect of presenilin inhibitor LY411575 on maturation of hepatitis C virus core protein, production of the viral particle and expression of host proteins involved in pathogenicity. (2016)
  • 著者名/発表者名: Otoguro T, Tanaka T, Kasai H, Yamashita A, Moriishi K.
  • 雑誌名: Microbiol Immunol. 巻: 60 ページ: 740-753
  • DOI: 10.1111/1348-0421.12448
  • 査読あり / 謝辞記載あり
• [学会発表] Cross-species compatibility of hepacivirus 5’ untranslated region (2016)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T, Otoguro T, Kasai H, Yamashita A, Okuyama-Dobashi K, Moriishi K
  • 学会等名: 第64回日本ウイルス学会総会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター（札幌白石区）
  • 年月日: 2016-10-23 – 2016-10-25
  • 国際学会
• [学会発表] CDK9 inhibitor FIT-039 suppresses HBV propagation (2016)
  • 著者名/発表者名: Moriishi K, Tanaka T, Okuyama-Dobashi K, Chen W, Okamoto T, Ueda K, Hosaya T, Matsuura Y, Ryo A, Tanaka Y, Hagiwara M
  • 学会等名: 第64回日本ウイルス学会総会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター（札幌白石区）
  • 年月日: 2016-10-23 – 2016-10-25
  • 国際学会
• [学会発表] Hepatitis C virus infection impairs mono-ubiquitination of histone H2A and activates expression of homeobox genes. (2016)
  • 著者名/発表者名: Kasai H, Tanaka T, Yamashita A, Dobashi-Okuyama K, Moriishi K.
  • 学会等名: 第64回日本ウイルス学会総会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター（札幌白石区）
  • 年月日: 2016-10-23 – 2016-10-25
  • 国際学会
• [学会発表] Establishment of highly HBV-permissible HepG2 cell line to facilitate screening of antiviral compounds (2016)
  • 著者名/発表者名: Otoguro T, Tanaka T, Chen W, Kasai H, Yamashita A, Okuyama-Dobashi K, Moriishi K
  • 学会等名: 第64回日本ウイルス学会総会
  • 発表場所: 札幌コンベンションセンター（札幌白石区）
  • 年月日: 2016-10-23 – 2016-10-25
  • 国際学会
• [学会発表] Inhibition of HBV propagation by treatment with CDK9 inhibitor FIT-039 (2016)
  • 著者名/発表者名: Tanaka T, Okuyama-Dobashi K, Chen W, Okamoto T, Ueda K, Hosaya T, Matsuura Y, Ryo A, Tanaka Y, Hagiwara M and Moriishi K
  • 学会等名: 2016 International HBV meeting
  • 発表場所: ソウル、韓国
  • 年月日: 2016-09-21 – 2016-09-24
  • 国際学会
• [図書] Structural Proteins of HCV and Biological Functions in "Hepatitis C virus I: Cellular and Molecular Virology" (2016)
  • 著者名/発表者名: Moriishi K, Matsuura Y, (Ed. by Miyamura T, Lemon SM, Walker CM, Wakita T
  • 総ページ数: 23
  • 出版者: Springer
• [備考] 山梨大学大学院総合研究部医学域基礎医学系微生物学講座
  • URL: http://www.med.yamanashi.ac.jp/clinical_basic/microbio/Microbiology_Yamanashi_Uni_Japanese/Home.html