HTLV-1感染ヒト化マウスを用いた未発症感染キャリア成立要因の解析

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 15K08506
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 藤澤 順一 関西医科大学, 医学部, 教授 (40181341)
• 研究期間 (年度): 2015-04-01 – 2018-03-31
• キーワード: ＨＴＬＶ－１ / ヒト化マウス / マウスモデル / Ｔａｘ

研究実績の概要

重症免疫不全マウスの造血系をヒト造血幹細胞で再構築したヒト化マウスにHTLV-1を感染させたところ、感染４週以内に末梢血感染細胞の急激な増加を伴い白血病死する個体群と感染４週以上生存する個体群に分かれたため、感染細胞あたりのウイルス遺伝子の発現を比較したところ、感染４週以内の感染細胞では、感染４週以降の細胞と比較して、HTLV-1の発がん遺伝子Taxの発現が高かった。そこで、Tax mRNAの発現にたいするプロウイルス挿入部位の影響を明らかにするため、感染マウス脾臓細胞より単離したゲノムDNAを鋳型にinverse-long PCRの手法で、プロウイルス挿入ゲノム断片をプラスミドDNAにサブクローニング後塩基配列を決定し、既知のヒトゲノム塩基配列との比較から、それぞれの挿入部位あるいは近傍に位置するヒト遺伝子を決定した。次に、それぞれのプロウイルス挿入部位の塩基配列を用いて、感染ヒト化マウスにおける各感染クローンの占有率を定量的PCRの手法で算出し、さらにNCBL Gene Bankの情報から得られた挿入部位遺伝子の脾臓における遺伝子発現量との相関を解析した。その結果、各感染ヒト化マウスにおいて高い占有率を示す感染クローンは、ほとんど全てが脾臓で発現する遺伝子のイントロン内に挿入されおり、ウイルス遺伝子が発現しやすいゲノム環境にある感染クローンが選択的に増殖している可能性が示唆された。また、感染４週以内の感染細胞では、感染クローンの占有率と挿入部位の遺伝子の発現量との間に正の相関傾向が見られたが、Tax発現が減少する感染4週以降のマウスにおいては、逆に負の相関が観察され、感染後期にはウイルスを発現しやすい細胞クローンが抗HTLV-1宿主免疫により排除されたと解釈された。

研究成果

• [雑誌論文] Human T-cell leukemia virus type 1 infects multiple lineage hematopoietic cells in vivo (2017)
  • 著者名/発表者名: Rie Furuta, Jun-ichirou Yasunaga, Michi Miura, Kenji Sugata, Akatsuki Saito, Hirofumi Akari, Takaharu Ueno, Norihiro Takenouchi, Jun-ichi Fujisawa, Masakazu Shimizu, Fumihiko Matsuda, Anat Melamed, Charles R Bangham, Masao Matsuoka
  • 雑誌名: PLOS Pathogens 巻: 13 ページ: -
  • DOI: 10.1371/journal.ppat.1006722
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Potential role of heme metabolism in the inducible expression of heme oxygenase-1 (2017)
  • 著者名/発表者名: Taka-aki Takeda, Machiko Sasai, Yuka Adachi, Keiko Ohnishi, Jun-ichi Fujisawa, Shingo Izawa, Shigeru Taketani
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Acta 巻: 1876 ページ: 1813-1824
  • DOI: 10.1016/j.bbagen.2017.03.018
  • 査読あり
• [学会発表] 抗HTLV-1抗体によるHTLV-1感染の活性化 (2017)
  • 著者名/発表者名: 西川瑞希、大村裕樹、上野孝治、田中勇悦、藤澤順一
  • 学会等名: 第4回日本HTLV-1学会学術集会
• [学会発表] 標的細胞との細胞接着による感染細胞プロウイルスの活性化 (2017)
  • 著者名/発表者名: 大村裕樹、西川瑞希、Ancy Joseph、上野孝治、藤澤順一
  • 学会等名: 第4回日本HTLV-1学会学術集会
• [学会発表] ヒト化マウスを用いたHTLV-1感染予防ワクチンにおけるアジュバント効果の組織病理学的検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 田中正和、 福原貴太郎、竹之内徳博、任翊華、姚錦春、李成一、植田祥啓、木梨達雄、藤澤順一
  • 学会等名: 第4回日本HTLV-1学会学術集会
• [学会発表] Effects of Tax vaccine adjuvants in HTLV-1 humanized mice (2017)
  • 著者名/発表者名: Masakazu Tanaka, Takataro Fukuhara, Sung-il Lee, Yihua Ren, Jinchun Yao, Norihiro Takenouchi, Yoshihiro Ueda, Tatsuo Kinashi, Jun-ichi Fujisawa
  • 学会等名: 第76回日本癌学会学術集会
• [学会発表] Analysis of HBZ gene product function in HTLV-1 infected mouse model (2017)
  • 著者名/発表者名: Takaharu Ueno、Ancy Joseph、Yuihua Ren、Jinchun Yao、Sung-Il Lee、Masakazu Tanaka Jun-ichi Fujisawa
  • 学会等名: 第65回日本ウイルス学会学術集会
• [図書] Adult T-cell Leukemia/Lymphoma (2017)
  • 著者名/発表者名: Jun-ichi Fujisawa
  • 総ページ数: (3-31)
  • 出版者: Springer Japan KK
  • ISBN: 978-4-431-56521-5
• [備考] 関西医科大学 微生物学講座
  • URL: http://www3.kmu.ac.jp/microbiol/KMU_Microbiology/Top.html
• [備考] 関西医科大学 医学部 学部・大学院 微生物学
  • URL: http://www.kmu.ac.jp/faculty/medical/category2/unit8.html