研究課題
脳卒中医療の向上を図るためには、特に脳卒中発症予測や早期発症診断を可能とする診断技術の向上が必要である。しかしながら、未だ脳卒中の急性期血液診断を可能とする決定的なバイオマーカーは見いだされていない。脳梗塞の発症に伴い血中に増加する中枢神経障害に特異的な液性因子を網羅的に探索する中で、神経細胞死と関連しうる機能未知の候補蛋白質(TMEM95)を見いだした。そこで本研究は、当該分子における生理的機能および中枢神経障害との因果関係を追求することによって、脳梗塞における神経細胞死機序の一端を解明することを目的としている。それにより、脳梗塞の新たな治療法を開発する上での手がかりを得ると共に、この機能未知分子に対する定量的な検出法を樹立することにより、病態生理学的根拠に基づいた急性期脳梗塞に対する新たな血液診断法を開発することを目指している。本年度には、研究計画に則り、1. 低酸素刺激による神経培養細胞におけるTMEM95 の発現の解析、2. 機能未知蛋白質であるTMEM95 が血中に放出されるメカニズムの解析、3. TMEM95 で誘導される神経細胞における細胞死の新たな分子メカニズムの解析、4. TMEM95 の脳組織での発現と局在の検証を行ってきた。その結果、培養細胞（ヒト神経芽細胞腫由来のSH-SY5Y培養細胞およびマウス神経芽細胞腫由来のNeuro2A培養細胞）を用いて、正常および1%低酸素刺激下でのTMEM95の細胞内の局在を経時的に検討したところ、非低酸素刺激下では核内にTMEM95の陽性所見を認めていたが、1%低酸素刺激下で8時間以上培養した細胞では、細胞質内に顆粒状凝集体を認めた。各種神経疾患の剖検脳における免疫組織化学的に検討を行い、神経細胞細胞質に陽性顆粒状構造物を認め、脳梗塞急性期症例ではpenumbra～core領域に多く検出されることを発見した。
2: おおむね順調に進展している
本年度には、研究計画に則り、1. 低酸素刺激による神経培養細胞におけるTMEM95 の発現の解析、2. 機能未知蛋白質であるTMEM95 が血中に放出されるメカニズムの解析、3. TMEM95 で誘導される神経細胞における細胞死の新たな分子メカニズムの解析、4. TMEM95 の脳組織での発現と局在の検証を行ってきた。そのうち、１、４については結果を得つつあるところであり、２、３については実験を始めている。従って、当初の予定通り研究は概ね進められている。
当初の計画通り、1. 低酸素刺激による神経培養細胞におけるTMEM95 の発現の解析、2. 機能未知蛋白質であるTMEM95 が血中に放出されるメカニズムの解析、3. TMEM95 で誘導される神経細胞における細胞死の新たな分子メカニズムの解析、4. TMEM95 の脳組織での発現と局在の検証を進めるとともに、本年度以降に予定していた6. 血中の機能未知蛋白質であるTMEM95 が急性期脳梗塞のバイオマーカーになりうる可能性の検証、7. TMEM95 を分子標的とした急性期脳梗塞治療法の開発のための予備検討に向けて順次実験を始める。特に６については、ELISAの系を構築する必要があり、そのために必要な抗体の取得とその信頼性の検証を中心に進める。
効率的に使用した結果、残余金が発生した。
平成２８年度予算に合算し、適切に使用予定である。
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Journal of Stroke and Cerebrovascular Diseases
巻: 25 ページ: 1165-1171
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Journal of Atherosclerosis and Thrombosis
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