| 研究課題/領域番号 |
15K08734
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| 研究機関 | 鳥取大学 |
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研究代表者 |
景山 誠二 鳥取大学, 医学部, 教授 (60252706)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | ヒト免疫不全ウイルス / 流行阻止・軽減 / エイズ発症予防 / ウイルス増殖能 / ウイルス量 / 薬剤耐性ウイルス |
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| 研究実績の概要 |
ヒト免疫不全ウイルス (HIV) の流行阻止・軽減、エイズ発症予防のために、感染者体内のHIV株の特徴を明らかにし、制御のための指標を発掘しようとしている。薬剤耐性HIV株の発生要因と、HIV株の増殖能からみた多様性を解析している。制御すべきHIV株の優先順位の議論に役立てる目的がある。
フィリピン共和国のフィールドで得た感染者由来の血清・血漿検体は、204検体に達した。全ての検体からHIV-RNAを分離し、RT-PCRによって増殖cDNAが確認されたものについて、1.4kbのpol遺伝子の配列を決定した。系統樹に展開し、過去のフィリピン共和国で確認された遺伝子配列データベース（自験例）を重ねた。さらに、全ての系統樹解析株に最も近縁であると判定された国際データベース上の株を系統樹上に重ねて解析した。その結果、フィリピン国内で耐性株が生まれていることが推定された。
HIV-RNAを分離した残りの血清・血漿のうち利用可能な量が残存していた検体を利用して、非感染者由来の抹消血液単核細胞との混合培養を行った。利用可能検体192個全てについて、28日間の培養を行った。28日間の培養の後、培養上清にHIV抗原が確認されたものが、38検体について確認されている。残り154検体の28日目培養上清からHIV抗原は検出されていないが、HIV量が抗原検出感度以下である可能があり、今後RT-PCRによって増殖HIV量の確認作業を行う予定である。それに引続き増殖能の分類作業を逐次行う。
一方、インドネシアでは、HIVの多様性をAPOBEC3Bを指標に検討した。HIV感染者においてAPOBEC3B-deletionと関連らみられたのは、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス、Torque Tenoウイルス、トキソプラズマ原虫の感染であった（J Clin Virol 70 (2015) 67-71)。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
下記６項目の進捗があったため。
（１）フィリピンのフィールドにてHIV感染者由来の血清・血漿を安定して採取できた。解析総数が2年度まで197検体になった。（２）HIV感染者由来の血清・血漿から単核細胞培養にてHIVを分離できた。総数38株以上になった。（３）増殖レベルの異なるHIVが同定された。増殖レベルの解析プロトコルが完成した。（４）上記197検体中の80%以上からHIV-ｃDNAを作出でき、その遺伝子配列を決定した。さらに、系統樹に展開できた。（５）系統樹解析より、フィリピン国内で耐性ウイルスが発生している事実が推測された。現在のプロトコルでは1年以内に10%弱の症例で耐性HIVが発生していることが推測された。（６）インドネシアのHIV感染者の随伴ウイルス感染には、宿主側の要因としてAPOBEC3Bの多様性が関与していることが強く示唆された。
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| 今後の研究の推進方策 |
本年度は３年目の最終年度であり、以下の５項目を達成する予定である。（１）既に分離したHIV株の増殖能を細分類する。（２）異なる増殖能を示す株のpol遺伝子系統樹上の位置を比較する。（３）薬剤耐性と増殖能との関連を解析する。（４）増殖能の違いに繋がる責任遺伝子の特定に向け、クローン化したウイルスの作成に入る。（５）上半期までの結果を論文に纏める。
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