| 研究課題/領域番号 |
15K08875
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
池松 和哉 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 教授 (80332857)
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| 研究分担者 |
山本 琢磨 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 講師 (50634458)
梅原 敬弘 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 助教 (60617421)
坪井 貴司 東京大学, 総合文化研究科, 准教授 (80415231)
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| 研究期間 (年度) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| キーワード | 慢性ストレス / miR－142 family / マウス |
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| 研究実績の概要 |
法医実務で経験する成人の虐待例において、剖検所見において決定的な「長期間のストレス持続」を証明する特異的な診断マーカーは全く知られていない。従って、長期に亘るストレス暴露に対する生体の反応を捉える新しい診断マーカーの同定が重要である｡本研究では、申請者らが既に同定した免疫系臓器にのみに発現するmiR－142 family（miR－142－3p並びに－5p）について、ストレス反応性を動物モデルで確認後、法医剖検例に応用して慢性的なストレス暴露を証明する法医分子病理学的診断法の確立を目的として本研究を行っている。
実際に、マウスモデルにてmiR－142 family（miR－142－3p並びに－5p）の発現量を可及的速やかに分子生物学的手法（Real Time PCR法：RT－PCR）を用いて検討を行い、候補マーカーとなり得るのかを確認した。具体的には、脾臓・胸腺においてmiR－142－3p並びに－5p共に単回ストレスではコントロールとの比較においてその発現量の差異は認められず、2週間、4週間連続ストレス群では有意に増加していた。このことは、miR－142 familyがストレス反応産物であることを物語るものである。
現在、miR－142 familyのターゲット遺伝子をon silicoで検索し、3pにて20個、5pにて10個程度の候補遺伝子を同定し、実際の生体内での発現量を検討している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
脾臓・胸腺ともにmiR－142 familyの発現が慢性ストレスにのみ差異が認められたことから、当初の予定通りの計画を進めることができている。また、miR－142 familyのターゲット遺伝子をon silicoで検索し、3pにて20個、5pにて10個程度の候補遺伝子を同定し、実際の生体内での発現量を検討しており、この点については当初の計画にないものであり、計画以上に進展しているものと考える。
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| 今後の研究の推進方策 |
マウスモデルにてIn situ hybridization法を用いて、可視化を行い、組織内局在、発現細胞同定を行う。
剖検症例の集積を行うとともに、剖検症例にてmiR－142 familyを動物モデルと同様の方法にて検討する。剖検症例では、In situ hybridization法を用いた半定量的検討を行う。
また、ターゲット遺伝子の定量、発現細胞同定をマウスモデルのみならずヒトにおいても行いたい。
これらの結果を踏まえた「長期慢性ストレス」暴露を証明する法医分子病理学的診断法を確立する。
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